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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » SephadexLH-20凝胶能用甲醇水系统能梯度洗脱不
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蛋蛋奋发向上

银虫 (正式写手)

[求助] SephadexLH-20凝胶能用甲醇水系统能梯度洗脱不 已有5人参与

1、我最近在分离黄酮苷类成分，做了预实验，发现SephadexLH-20凝胶用甲醇水梯度洗脱会有气泡，但是效果还不错，可是过完柱子柱子就千疮百孔了，这样操作应该是不规范的，但是我看到有一些文献就是有用这个凝胶梯度洗脱的，很奇怪啊，能不能这样用啊？？？？
2、过凝胶的高手们，下面是一张HPLC40%甲醇等度洗脱的图谱，样品是已经过了制备液相的图谱，发现制备柱（C18）分不开，我想再过凝胶（内径更细），有没有高手们遇到这种分不开的峰，然后用凝胶能分开的呢？

SephadexLH-20凝胶能用甲醇水系统能梯度洗脱不
40%醇液洗脱.jpg
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1楼 2015-11-02 18:28:15
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songhongxin

新虫 (初入文坛)
可以洗，作为反相色谱

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2楼2015-11-03 11:14:17
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蛋蛋奋发向上

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by songhongxin at 2015-11-03 11:14:17
可以洗，作为反相色谱

换梯度洗不会出现气泡吗？
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3楼2015-11-03 12:45:55
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风过云动

银虫 (正式写手)
比鬼神更可怕的是人心！比鬼神更可爱的是人心！不要因为冬的寒冷彻骨！而忘确了雪的冰清玉洁！

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4楼2015-11-03 13:15:09
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cjpballack

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蛋蛋奋发向上: 金币+30, ★有帮助 2015-11-03 16:03:10
我用过梯度洗脱，效果还不错，不过没有出现气泡，如果有气泡了，就重装柱吧……至于制备，那个可以分两段接，左右边各接一个就能纯
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但行好事，莫问前程
5楼2015-11-03 14:10:38
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蛋蛋奋发向上

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cjpballack at 2015-11-03 14:10:38
我用过梯度洗脱，效果还不错，不过没有出现气泡，如果有气泡了，就重装柱吧……至于制备，那个可以分两段接，左右边各接一个就能纯

恩  谢谢  我知道了。
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6楼2015-11-03 16:05:08
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276504177

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先看看能不能在薄层板上分开，一般凝胶能分开的话，薄层板上都能分的开
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7楼2015-11-03 19:46:26
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嘉叶秋

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以用，用过甲醇水80-20的，有机相多一点应该没有问题。
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8楼2015-11-04 09:56:16
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hym0411

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以得，用甲醇水时LH-20既有分子筛效应也有反相分离效果，有气泡可能是柱子里的纯甲醇遇水有放热现象，而且甲醇水柱会流得很慢，柱子里的甲醇水要梯度换成所用甲醇水比例。有气泡了就得重新装柱，用所用比例的甲醇水把凝胶泡好再装柱。
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生而无涯
9楼2015-11-04 22:17:04
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lyy5563

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

出现气泡可能是你的操作有问题！甲醇水混合后，一定要超声脱气20min，否则很容易出现气泡！
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10楼2015-11-06 16:24:29
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