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xjtu2010

金虫 (小有名气)

[求助] 金币大放送!!!!!求助!!!MC3T3细胞诱导分化(用BMP2诱导分化)问题看进来!已有2人参与

最近在用BMP-2 诱导小鼠前成骨细胞MC3T3分化,准备做ALP检测和RT-PCR。
我在文献中看到细胞汇合度要达到80%,细胞种6孔板养了2天后,加BMP-2刺激,可是3天后细胞都长满了!!!!!!!!
我看文献里做诱导分化都有5天、7天、14天、21天的,这么长时间,一个孔里早都长满了,难道是要传代么,这个问题是怎么解决的啊???
求各位大神帮忙出出主意,不胜感激!!!!
MC3T3细胞用BMP-2诱导分化靠谱吗?效果好吗?我在怀疑是这东西本身诱导效果不好?还是细胞培养中还需要摸浓度+特定条件处理啥的?
虫子们有做过该实验的吗?求指导,很急!!!!!
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zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-11-01 18:08:00
看看人家的东东
吡格列酮对高糖环境下MC3T3-E1早期成骨细胞增殖、凋亡和功能蛋白OCN、ALP、BMP2表达的影响
http://www.doc88.com/p-70121150656.html
2楼2015-10-31 18:33:57
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xjzhan6268

至尊木虫 (职业作家)

3楼2015-10-31 19:00:55
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xjtu2010

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2015-10-31 18:33:57
看看人家的东东
吡格列酮对高糖环境下MC3T3-E1早期成骨细胞增殖、凋亡和功能蛋白OCN、ALP、BMP2表达的影响
http://www.doc88.com/p-70121150656.html

谢谢!我是想知道如何用BMP-2诱导细胞分化。实验结果显示细胞过度增值而非分化。
文献中也有抗坏血酸和β-甘油磷酸钠处理的,这3种方法不知道哪种效果好?
4楼2015-10-31 19:19:03
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xjtu2010: 金币+5, 有帮助, 我用的是10%的血清,真有可能是这个原因 2015-10-31 21:38:07
貌似需要维持细胞密度的时候要用百分之三的血清吧?!楼主血清可能加多了

发自小木虫Android客户端
5楼2015-10-31 19:48:38
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wangxueru

新虫 (小有名气)

请问楼主你的问题解决了吗?可以交流下吗?您做ALP几天后差异显著呢?
6楼2019-07-01 15:44:40
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