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xiao翼儿

新虫 (初入文坛)

[求助] 分子印迹蛋白洗脱

求助:
      分子印迹蛋白洗脱的时候,文献上1%SDS和10%乙酸溶液是混在一起进行洗脱的还是有先后顺序的依次进行洗脱呢?加这两个的目的是什么?
希望有经验的大神帮忙解答一下,谢谢啦!
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rigor-hunter

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2楼2016-02-27 00:09:31
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xiao翼儿

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by rigor-hunter at 2016-02-27 00:09:31
混合以后洗脱,不过一般是10%sds这个需要优化,sds浓度越大会导致非特异性吸附。会同时提高印记和非印迹的吸附量

是10%乙酸溶液吧?混合以后他们之间会不会起反应呢

发自小木虫IOS客户端
3楼2016-03-04 12:51:20
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rigor-hunter

禁虫 (初入文坛)

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4楼2016-03-07 12:31:14
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xiao翼儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by rigor-hunter at 2016-03-07 12:31:14
是10%的乙酸,有的洗脱液看效果还加入氯化钠作为辅助洗脱。乙酸跟SDS不反应,蛋白印迹很难洗干净的。这个也困扰我了很久。而且吸附试验数据也不稳定。我想问下你,你做的蛋白印迹达到吸附平衡需要多长时间
...

是这样的,其实我做的是分子印迹细菌,参考的印迹蛋白的一些方法,我觉得是不是聚合物操作反应过程造成的不稳定呢?那你用的是什么方法合的分子印迹聚合物呀

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-03-12 21:05:23
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lwq827975

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by rigor-hunter at 2016-03-07 12:31:14
是10%的乙酸,有的洗脱液看效果还加入氯化钠作为辅助洗脱。乙酸跟SDS不反应,蛋白印迹很难洗干净的。这个也困扰我了很久。而且吸附试验数据也不稳定。我想问下你,你做的蛋白印迹达到吸附平衡需要多长时间
...

你好 能问一下您最后用的什么洗脱液嘛 效果怎么样呀(因为最近也在做这个。。。)
6楼2018-09-27 08:47:21
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