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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC测出的纯度问题
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小小小鲸鱼

金虫 (小有名气)

[交流] HPLC测出的纯度问题

我分出的一种东西想用用HPLC来测一下纯度（应该不是特别纯），紫外是双波长，结果测得的纯度大概在85%作用，但老板说HPLC测得的纯度不准确，这是为什么呢？？
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1楼 2008-09-09 14:48:45
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jinshanshi88

木虫 (著名写手)
不准也有可能，看看你用的是什么方法呀，如果是对照品做标准曲线，求浓度算含量应该很准，但是你用面积归一化法等其他方法就有可能不准
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2楼2008-09-09 15:07:35
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lofour

木虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
Hplc的检测器范围是有限的，比如用紫外就不能检测到不具有吸收特征的化合物，建议做个氢谱或者质谱
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3楼2008-09-09 15:43:49
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kkbyb

木虫 (著名写手)
用个通用检测器，比如蒸发光散射或示差折光，紫外诚如3楼说的，毕竟还属于专属性不是很好的专属检测器。
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4楼2008-09-09 19:46:00
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xgkzb

金虫 (正式写手)
物质的最大吸收也不同
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5楼2008-09-09 23:50:20
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alex_goom

金虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
引用回帖:
Originally posted by lofour at 2008-9-9 15:43:
Hplc的检测器范围是有限的，比如用紫外就不能检测到不具有吸收特征的化合物，建议做个氢谱或者质谱

HPLC 85％做HNMR简直就是浪费钱，做出来的图肯定很杂乱，看得头疼，一般HPLC归一法95％以上做HNMR才有意义。

建议楼主进一步提纯，得到纯物质（>99%,HPLC area）做标样，HPLC用外标法定含量才准。
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6楼2008-09-10 15:18:55
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xwt7610

铜虫 (初入文坛)
纯度不准确，还是纯度不够。
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7楼2008-09-10 15:28:05
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蝈蝈2828

用标准品标定
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8楼2008-09-10 15:49:49
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wupo

铁虫 (初入文坛)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！
如果要测纯度
建议做个加样回收率
可以看看准不准确

另外不同的检测器用回归计算的时候有的时候是呈对数分布的，比如蒸发光
紫外的最大吸收也需要多考虑，有时候不同的仪器有些偏差
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抬头微笑
9楼2008-09-16 20:19:15
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landi9568

铜虫 (小有名气)
紫外只能检测有紫外吸收的物质，所以你们老板说不准确，建议用质量型的检测器，ELSD就可用，没有必要用质谱
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10楼2008-09-19 21:13:26
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