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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 纤维素水解成葡萄糖乙酰化后GC测试含量超过100%
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极地以北

木虫 (正式写手)

[求助] 纤维素水解成葡萄糖乙酰化后GC测试含量超过100% 已有1人参与

如题，我的纤维素样品是利用不同分离方法从一些生物质材料中分离出来的，纤维素含量估计在50-90%之间。

样品的测试方法按照一个实验室现有的方法，将样品用酸水解成葡萄糖，然后乙酰化后用CH2Cl2萃取，进色谱，GC。以2-脱氧-D-葡萄糖作为内标物进行定量。

奇怪的是，我的纤维素样品称取了10-12毫克，内标也是10mg，结果，葡萄糖的峰面积总是大于内标很多，计算得到的纤维素含量在样品中的含量在120-190%间。重复测试多次，结果都是如此。

请教下有相关糖类或者纤维素类测试经验的虫友们给提提意见，看看可能什么地方出问题了。多谢！！！

试了好久，不能上传照片、图片和文档……
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1楼 2015-10-27 08:39:40
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wenwang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
极地以北: 金币+28, ★★★很有帮助, 2 2015-10-27 19:35:49
对纤维素不大懂,只能从GC角度帮你理下思路.如你方法所说,你使用2-脱氧-D-葡萄糖作为内标,水解成葡萄糖乙酰化产物作为分析目标物,对吧?那你的峰面积他俩是没有可比性的,内标在内标定量法中的作用是排除系统误差,而不是作为定量基准物来比对的.你要比较的话,应该拿纯葡萄糖的乙酰化产物作为基准物来比对来定量才是.不知道对你有没有帮助.
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2楼2015-10-27 08:56:42
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极地以北

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wenwang at 2015-10-27 08:56:42
对纤维素不大懂,只能从GC角度帮你理下思路.如你方法所说,你使用2-脱氧-D-葡萄糖作为内标,水解成葡萄糖乙酰化产物作为分析目标物,对吧?那你的峰面积他俩是没有可比性的,内标在内标定量法中的作用是排除系统误差,而不 ...

谢谢你的帮助。
补充一下：我有外标的，2-脱氧-D-葡萄糖和葡萄糖的混合物，已知浓度，做为这个测试的外标。定量是根据外标中两种糖的峰面积、内标物的峰面积，以及目标测试物的峰面积来计算的。
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3楼2015-10-27 19:35:25
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