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lifeifei88

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相梯度与等度的区别？ 已有4人参与

分析液相上走等度可以分的很好，而半制备液相上就分不开了。为什么？分析液相上，等度可以分开的有必要走梯度吗？有什么不同？图1分析液相，图2半制备液相

液相梯度与等度的区别？


液相梯度与等度的区别？-1


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1楼 2015-10-26 16:08:10
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zongyuan

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
半制备色谱柱柱效差，或者进样量太大
你如果做制备可以量小点在半制备上找条件，等度分离，之后提高有机相比例冲柱即可
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2楼2015-10-26 16:19:40
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匿名

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3楼2015-10-26 18:21:57
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lifeifei88

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zongyuan at 2015-10-26 16:19:40
半制备色谱柱柱效差，或者进样量太大
你如果做制备可以量小点在半制备上找条件，等度分离，之后提高有机相比例冲柱即可

半制备等度分不开呢

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4楼2015-10-26 20:46:39
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lifeifei88

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lich666 at 2015-10-26 18:21:57
如果是手工装的柱分不开正常，最好用HPLC预装制备柱。

是安杰尔的柱子呢

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5楼2015-10-26 20:47:22
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匿名

用户注销 (知名作家)

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6楼2015-10-26 20:58:27
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mao877516786

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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lifeifei88: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-10-27 11:27:20
又看到你的帖子了忍不住多说几句，不知道你的柱子大小，流速高低，但还是感觉出峰时间太早了，如果是70%甲醇出峰，如果是我做我可能会这么做，先40%-85%--60min,确定出峰浓度，然后在该出峰浓度左右各7个浓度单位跑50min，应该可以了，如果还不行你应该考虑目标峰的出峰浓度是不是太靠前了，然后你还要考虑半制备的柱子填料和分析的柱子填料是不是一个型号的，如果不是那么可参考性会打折扣，此外如果在梯度正常运行后还不能分离就考虑一下更换一下流动相吧。再补充一点最好保证在运行梯度4柱体后出目标峰可能会靠谱些。忘说了你的检测器要支持梯度检测吆。
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7楼2015-10-27 11:18:23
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lifeifei88

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by mao877516786 at 2015-10-27 11:18:23
又看到你的帖子了忍不住多说几句，不知道你的柱子大小，流速高低，但还是感觉出峰时间太早了，如果是70%甲醇出峰，如果是我做我可能会这么做，先40%-85%--60min,确定出峰浓度，然后在该出峰浓度左右各7个浓度单位跑 ...

我的柱子是艾杰尔的promosil C18 21.2*250mm.5um的，流速是5ml/min，走过梯度，效果不好，谢谢你的回复，我在试试

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8楼2015-10-27 11:31:36
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zhuht888

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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lifeifei88: 金币+2, ★有帮助 2015-10-29 10:19:02
从分析柱到制备柱的放大，不仅仅是柱体积、上样量、流速等按放大因子线性放大，还得考虑柱填料一致性，还有柱温度，而且温度对制备柱因为柱管壁效应没法像小分析柱那么容易控温，所以有时分析柱能在柱温箱在某温度下分开了，但到半制备因为没法控制温度，分不开也是正常的。
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9楼2015-10-28 15:58:18
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