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石斛生物碱测定的问题
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标准溶液制备 称取干燥至恒重所得石斛碱对照品1.03ｍｇ,氯仿溶解并定容至100ｍＬ,作为 标准溶液。 1.3.2.2 标准曲线制备 吸取石斛碱标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ｍＬ分别置于分液漏斗中,加 氯仿至10.0ｍＬ,再加入ｐＨ值4.5的缓冲溶液5.0ｍＬ和0.04%的溴甲酚绿溶液1.0ｍＬ后剧烈振摇3ｍｉｎ, 静置30ｍｉｎ,用氯仿浸泡处理并用干燥的脱脂棉过滤,取续滤液6.0ｍＬ,加0.01ｍｏｌ/Ｌ的ＮａＯＨ无水乙醇溶 液1.0ｍＬ,摇匀。依同法以氯仿制备空白对照。于波长620ｎｍ处测定吸收度,绘制标准曲线。回归方程 为:Ａ=0.067 6×Ｃ-0.035 9,γ=0.999 1。 石斛碱含量为1.03～6.18μｇ/ｍＬ,即符合朗伯—比尔定律。 1.3.2.3 样品溶液制备 称取石斛粉末500ｍｇ,用适量氨水润湿后加塞密闭放置30ｍｉｎ,加入氯仿 10.0ｍＬ后称重。80℃水浴上热回流2ｈ,冷却后补足氯仿至原重,过滤。吸取续滤液1.0ｍＬ于10ｍＬ容量 瓶中,以氯仿定容至刻度,再从中吸取2.0ｍＬ置25ｍＬ容量瓶中以氯仿定容,摇匀作为样品液。 1.3.2.4 样品中总生物碱含量测定 吸取样品液10ｍＬ,按标准曲线制备步骤操作,测定吸收度。样品 中总生物碱含量按下式计算: 总生物碱含量(以石斛碱计)%=875×(样品液吸收度+0.035 9)405 600×样品量×100% 用这个方法测石斛的生物碱 为什么吸光度测的样品和标准品都是负的 空白对照是以氯仿的意思吗 还有那个公式是什么意思？ 求大神助 新人没什么分 谢谢 |
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2楼2015-10-26 09:45:19