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sagaphilip

新虫 (初入文坛)

[求助] 不明蛋白质溶液的蛋白含量怎么测 已有1人参与

对生物化学实验不太了解。现在有一种复杂蛋白混合物冻干粉,离心后收集上清液中蛋白,想测一下上清液中的蛋白含量。这种情况用什么方法测比较方便合适。望赐教!
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Elaine4_0328

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

凯氏定氮法:蛋白转化成铵盐测氨,125-1250ug/ml,干扰物质:非蛋白氨
BCA法:蛋白还原Cu++为Cu+后与BCA试剂发生紫红色反应,25-2000ug/ml,干扰物质:巯基乙醇、蔗糖,EDTA等
Bradford法:蛋白染料蓝色反应,125-1000ug/ml,干扰物质:碱性溶液
Lowry法:蛋白与Cu++酚试剂蓝色反应, 10-100ug/ml,干扰物质:某些氨基酸、非离子表面活性剂、蔗糖等
A280nm紫外吸收波长法:酪氨酸、色氨酸光吸收,100-1000ug/ml,干扰物质:核酸类、酚类
A215-A225差值比较法:经验公式
都是可以用的方法。你分别查查你的冻干粉的组成,以及实验室能用的试剂、仪器等
3楼2015-11-13 11:09:41
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麦子果树

新虫 (小有名气)

Bradford法或者用BCA试剂盒通过酶标仪测定,网上百度哈,有好多方法的
2楼2015-10-23 17:47:21
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