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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 yang-1166 的 1 个金币

yang-1166

[交流] 求问连接8000kb的片段用什么载体好?0

我有一个片段啊,做了很久,8000KB大小,先用PGE-T,转不进去,再用PMD18-T,还是转不进去,请问大家用什么载体好?我现在都不相信说明书了,那些说明书上都写可以转大片段的,我现在就相信大家的经验之谈了,比那个商家可信度高多了
请大家多说说,多给我几个选择
谢谢,叩拜
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)

片段太大了吧,8000kb=8000000bp什么东西这么大!!!!
2楼2008-09-08 12:49:02
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thesea3983

铁虫 (小有名气)

应该是8kb吧!怎么会那么大呢?
3楼2008-09-08 12:56:24
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yang-1166

是说错了,是8kb
4楼2008-09-08 16:38:41
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Expression

木虫 (正式写手)

你转这么大个东东干什么用呢??测序。。。。。。
5楼2008-09-10 08:44:42
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weizhang423

铁虫 (初入文坛)

8k+载体3k左右,最后超过10k,因此要利用电转才能获得较好的效果
6楼2008-09-10 08:51:27
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

用PBluescript(SK+)吧,3kb+8knb=11.电转化
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2008-09-10 10:16:55
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zemin_fang

木虫 (正式写手)

我在做DNA片段亚克隆的时候,用PUC19/BamHI载体,连上过超过10k的片段,建议你用厂家酶切好的载体,这样效率会高很多。
8楼2008-10-02 21:03:56
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克隆大虾

铁杆木虫 (著名写手)

试试pMD20-T
我以前连成过5kb左右。
9楼2008-10-02 22:21:55
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chenliang_0513

铁杆木虫 (职业作家)

这么大的载体最好用电转化的方法

或者用MAGIC的方法

不过要改载体

如果你们实在做不出来,叫你们老板出点钱我们帮你们克隆吧,保证1周内搞定
我本将心向明月,奈何明月照沟渠?
10楼2008-10-03 09:17:10
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