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芯微蓝

金虫 (初入文坛)

[求助] STZ(链脲佐菌素)与胰岛细胞作用的问题

我想用STZ损伤部分胰岛细胞,但是在加药时遇到了问题。STZ需要在低温、避光、pH4.2柠檬酸缓冲液的条件下配制和给药。处理30min后做CCK8。
我使用了三种方法:
1)pH4.2柠檬酸缓冲液+STZ(100μL药液+细胞
2)pH4.2柠檬酸缓冲液+STZ(浓缩给药,10μL药+100μL培养基+细胞)
3)细胞培养基溶解STZ(STZ+100μL培养基)
1和2的结果是低pH使细胞有较大损伤,以至于不能判断损伤来自酸性条件还是STZ本身。即使浓缩给药也不行。
3的结果是即使达到为所看文献中最大给药浓度,也仅能损伤20%左右的细胞(加入CCK8 1小时的时候),而且加入CCK8 2小时后,与对照孔细胞数目无差别了。
求助各位虫友指点一二,多谢多谢。
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