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liubolin945

铁虫 (小有名气)

[求助] 3'RACE,PCR的问题,Oligo(dT)

请教大家点问题。
有303bp的片段,要做3’race,用Oligo dT进行反转录之后再进行巢式PCR,但是效果不理想。
3'RACE,PCR的问题,Oligo(dT)
做了一个梯度PCR,因为特异性引物都是Tm都是56,而Oligo dT是44,差太多,我不知道怎么确定退火温度,所以做了一个梯度。
左侧是outerPCR,右侧是用对应的Outer PCR产物稀释后进行的Inner PCR。
为什么会弥散啊?这个弥散位置是有条带吗?
怎么解决oligo退火温度低的问题啊?
谢谢大家
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QQ:277046172
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5斤亲戚

新虫 (初入文坛)

请问楼主,问题解决了吗

发自小木虫Android客户端
2楼2020-08-25 16:30:33
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