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生化实验:氨基酸纸层析 已有1人参与
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| 氨基酸纸层析的Rf值小于标准氨基酸Rf值是什么原因 |
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执着的狼
铁杆木虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
winnerwfy: 金币+5, ★有帮助 2015-10-21 23:10:01
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Rf值决定于很多因素,其中最主要的是所分离物质的分配系数,物质的分配系数是由以下因素决定的: (1)物质极性的大小:水的极性很强,一般极性强的物质就容易进入水相,非极性的物质易进入有机溶剂中。例如:侧链含-OH和-NH2、-COOH较多的氨基酸易分配在水相中,Rf值较小。而含非极性基(如-CH3)较多的物质其分子的极性降低,Rf值增大。 (2)滤纸的质地以及为水分饱和的程度:滤纸的质地必须均一、纯净、厚薄适当,具有一定的机械强度,层析前应为水和有机溶剂的蒸汽所饱和。若滤纸的质地一般则会影响氨基酸的移动,导致Rf偏小。 (3)溶剂的纯度、PH值和含水量:PH值和含水量改变可使氨基酸和层析溶剂极性改变,Rf值也随之改变。 (4)层析的温度和时间:温度改变使溶剂中有机相含水量改变,Rf值也改变。当所有条件相同时,层析时间短,则Rf值小。 因此,在层析过程中,对以上影响Rf值的因素必须严格控制,另外人为误差也可能影响Rf值。 |

2楼2015-10-19 19:42:16











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