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sdauvet2006

金虫 (小有名气)

[交流] 请问用什么染料测流式测阿霉素/多柔比星的凋亡坏死和细胞周期? 已有1人参与

近期要做阿霉素联合其他药物对凋亡促进作用,用到流式测凋亡相关指标,双染的话大都用Annexin V FITC细胞凋亡检测试剂盒,阿霉素本身的荧光对FITC和PI应该有影响,不知道选什么染料合适,求助各位大神,多多交流,发表意见,谢谢!
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350330842

新虫 (初入文坛)

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凋亡试剂盒是蓝光激发,PI在515,阿霉素在575,可以先用阿霉素和空白细胞做个阴性对照,试一下荧光强度有多少,再确定怎么做

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2楼2015-10-18 16:04:24
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sdauvet2006

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by 350330842 at 2015-10-18 16:04:24
凋亡试剂盒是蓝光激发,PI在515,阿霉素在575,可以先用阿霉素和空白细胞做个阴性对照,试一下荧光强度有多少,再确定怎么做

多谢大神指教!有人说可以用仪器校准功能调十字线,可以只做阴性对照,不做单染对照,请问这个方案可行吗?
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3楼2015-10-30 09:39:01
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3楼: Originally posted by sdauvet2006 at 2015-10-30 09:39:01
多谢大神指教!有人说可以用仪器校准功能调十字线,可以只做阴性对照,不做单染对照,请问这个方案可行吗?...

初期摸实验条件还是建议都做一下,而且我不是很理解您说的调十字线是指补偿吗?

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4楼2015-10-30 10:45:34
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sdauvet2006

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 350330842 at 2015-10-30 10:45:34
初期摸实验条件还是建议都做一下,而且我不是很理解您说的调十字线是指补偿吗?
...

对,软件有补偿功能,把十字调正,是不是就只测样品和阴性对照,这样在四个象限都有分布,只调整补偿就行,是这样吗?
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5楼2015-12-03 17:38:36
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5楼: Originally posted by sdauvet2006 at 2015-12-03 17:38:36
对,软件有补偿功能,把十字调正,是不是就只测样品和阴性对照,这样在四个象限都有分布,只调整补偿就行,是这样吗?...

如果条件摸好是可以这样做的,但是前期千万别为了省事,这样做容易测不准,因为你们样品里本来就有荧光

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6楼2015-12-07 13:57:21
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