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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 细胞加入慢病毒进行转染后24小时发现死了很多
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大白杨

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞加入慢病毒进行转染后24小时发现死了很多 已有1人参与

最近对神经干细胞进行慢病毒转染，MOI值是用的20，加病毒液24小时后换的新培养液，但是24小时的时候显微镜下观察发现实验组比没加病毒液的空白组细胞少了一半以上刚开始感觉是不是24小时后去掉病毒的培养液太晚了，但是公司那边说他们是24小时。
想问下大家，一般哪些可能性会出现慢病毒转染的时候细胞大量死亡？是不是和实验操作过程中的一些技巧有关？
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1楼 2015-10-15 15:02:14
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dujincheng

金虫 (小有名气)
能帮菜鸟解决一个问题吗  最近在看致病菌侵袭细胞的实验，那里所说的（MOI20:1）和（MOI200:1）收什么意思吗  多谢
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万物看似随机，但都有其定律。
3楼2015-11-23 08:48:01
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
慢病毒感染后细胞死亡的原因有以下几个可能：
1. 慢病毒纯化未到位，对细胞毒性较大。这种情况下，如果细胞没有全部死亡，建议重新感染，在感染后8h换液。或者把生存的细胞扩大培养，然后做后续实验。
2. 细胞污染，可能是支原体、细菌等等原因

3. MOI值不准。这种情况可能是预实验没有做到位，需重新摸索MOI
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我就是我IamwhatIam
2楼2015-10-18 00:06:08
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