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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 在发酵过程中，涉及近20种酶，如何确定哪些酶是关键性酶？如何确定其酶基因？
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sumang

铁虫 (小有名气)

[求助] 在发酵过程中，涉及近20种酶，如何确定哪些酶是关键性酶？如何确定其酶基因？ 已有2人参与

求解答，求帮助，求详细，本人才开始学习，本领域的小白，求大神帮助
在发酵合成紫杉醇的过程中，涉及近20种酶，如何确定哪些酶是关键性酶？如何确定其酶基因？
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1楼 2015-10-15 11:57:26
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sumang: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 大神分析的挺好 2015-10-16 20:57:36
敲除然后验证产物的变化

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2楼2015-10-15 12:12:01
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sumang

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2015-10-15 12:12:01
敲除然后验证产物的变化

这个方法我考虑过，关键是接近20种关键酶，并且部分没还没确定基因序列。
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3楼2015-10-15 12:50:22
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
多实验几种酶，还可以考虑真菌RNAi

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4楼2015-10-15 14:06:29
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feng-feng

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sumang: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-10-16 20:57:45
是不是可以考虑双向电泳找出关键酶，再质谱测序反推找到基因
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5楼2015-10-16 09:35:04
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wangzi4ever

金虫 (正式写手)
从两个大方面来做：
一，查找文献，看看国内外的研究进展与结果（即有研究思路、也有研究方法），这是实验前、中、后都需要做的事情。
二，方法设计：在阅读文献的基础上选择试验方法，这种寻找通路的试验，方法很多，结合实验室条件与试验周期选择方法，全基因组测序，表达谱，酶谱，敲除，超表达，RNA干扰等等，自己根据实际选择吧。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-10-18 08:31:39
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