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heqi1129

新虫 (初入文坛)

[求助] 膜蛋白对角线电泳的优化

打算做膜蛋白对角线电泳(double SDS-PAGE),先用总蛋白做了预实验。普通小胶板,第一向浓缩胶5%,分离胶10%(加了1.2g尿素)。第二向只有分离胶16%,Bicine缓冲液系统。上样量为8微升。第一向跑完后R-250染色过夜,第二天再酸化脱色和进行第二向电泳。

结果(如图)是能看得出对角线条带,但分辨率太低了......

求问有做对角线电泳经验的前辈,指点一下如何提高分辨率,以及对角线电泳要注意的地方。谢谢!!!

膜蛋白对角线电泳的优化
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