刚刚接触RNA干扰，但是不知道这个RNA序列怎么来，用什么软件来做，怎么选择等等问题。 - 分子生物 - 干扰/敲除

11楼2016-03-01 15:31:59

反应链

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11楼: Originally posted by orangeiii at 2016-03-01 15:31:59
请问你构建过RNAi载体吗
有问题咨询呢...

What can I do for you?
BTW, how about your negative control without insert DNA, which can be used for confirming double digestion completely?
Maybe you can make the vector ends blunt. Then a single T will be added respectively to the 5′ ends of the vector with Taq DNA polymerase. After that a TA-cloning-like assay will be done, and the direction of inserted DNA can be selected by sequencing.

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12楼2016-03-01 22:50:31

梦与命

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4楼: Originally posted by 反应链 at 2015-10-14 20:10:44
1. 你们实验室有RNAi载体骨架，也就是可以直接插入目的基因正向片段和反向片段的重组质粒吗？我们需要依据RNAi载体骨架的酶切位点设计引物。比如，2楼的pHANNIBAL载体骨架，其正向片段插入位点为XhoI和KpnI，反向片 ...

您好请问实验室如果没有丝状真菌rna干扰用的载体话需要自己构建吗？

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13楼2020-02-17 21:10:50

梦与命

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正向片段和反向片段扩增用的引物一样吗？如果不一样的话是把编码氨基酸的cDNA序列反向一下还是互补一下再来设计引物呢？搞不懂了如果实验室没有骨架的话正反向片段间的连接序列用什么呢

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14楼2020-02-20 00:12:03