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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物信息 » MDCK细胞做流感病毒TCID50，但是在无血清培养基中一直生长
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子衿87

新虫 (初入文坛)

[求助] MDCK细胞做流感病毒TCID50，但是在无血清培养基中一直生长 已有1人参与

用MDCK细胞做流感Ca04毒株的TCID50，但是对照组的MDCK细胞在无血清的DMEM中一直生长，并且长的很快，我确定我用PBS洗干净了，洗了2遍。这么一直长，很难判断3天后细胞的病变了，因为都长的很满，形态也都变了。用流感感染的时候我是加了TPCK胰酶的。求助啊，这个实验做了几次怎么总是做不出来总是失败。
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1楼 2015-10-13 11:16:35
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李时珍7885

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

无血清条件下，细胞还在长，证明细胞未单层，3天后，不影响细胞病变观察及血凝测定，CCID50，可以72小时收获直接测定血凝，判定结果
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2楼2015-11-11 14:07:36
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李时珍7885

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

如果小有血清培养，最好用PBS或含钙离子的缓冲液冲洗三遍
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3楼2015-11-11 14:08:58
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子衿87

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 李时珍7885 at 2015-11-11 14:08:58
如果小有血清培养，最好用PBS或含钙离子的缓冲液冲洗三遍

谢谢，回复晚了不好意思
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4楼2015-12-21 17:33:31
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骚年的奋斗

新虫 (小有名气)
我想问一下你的TPCK胰酶是怎么配制的？我想要配10mg/ml的TPCK胰酶，我从麦克林公司买的试剂，是粉末状的但是没有说明书，咨询了商家，上面说用1mM HCl盐酸溶解，但我现在配置的发现并没有溶解，求指教
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保持清醒
5楼2016-04-11 16:08:12
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wangyoucao52

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 骚年的奋斗 at 2016-04-11 16:08:12
我想问一下你的TPCK胰酶是怎么配制的？我想要配10mg/ml的TPCK胰酶，我从麦克林公司买的试剂，是粉末状的但是没有说明书，咨询了商家，上面说用1mM HCl盐酸溶解，但我现在配置的发现并没有溶解，求指教

我们的TPCK胰酶是用PBS稀释溶解的
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6楼2016-04-14 16:36:50
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