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81631731金虫 (小有名气)
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含过表达WNT基因的慢病毒转染hMSC荧光很弱 已有1人参与
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最近在转过表达的WNT9A的慢病毒到hMSC，第一次设定MOI为50,100,150，作用24h换液，发现荧光很弱，于是将MOI翻倍补加慢病毒。48h后荧光还是很弱，而且转染率也很低。但是细胞也长满了就接着往下传代，荧光依然较弱。后来放假就么有管了，等节后看看貌似荧光率有上升，但是细胞推挤厉害状态不好，没有接着往下传代（当时真应该再试试的......），而且把曝光时间调长一点貌似也还行（因为当时还转了eGFP，所以心里就默认那个荧光强度才是正常的，这也是考虑不周全的地方）。但是后来又重复了一下MOI，同时领导说作用时间太长影响细胞状态，所以又试着将作用时间改为8h，完全没有荧光啊啊啊！！！ 同批转染含eGFP的慢病毒，MOI为50荧光率达100%，而且荧光很亮。 请问这是什么问题？病毒的滴度是10^8数量级，但是为什么转染效率这么低呢？？？ 求大神赐教！！！ |
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