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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求各位大神发一下大肠杆菌的直接拿去做SDS电泳的步骤
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997821428

铜虫 (小有名气)

[求助] 求各位大神发一下大肠杆菌的直接拿去做SDS电泳的步骤 已有2人参与

求各位大神发一下大肠杆菌的直接拿去做SDS电泳的步骤
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姐不约，咱不约。啥？为啥？姐爱妹子
1楼 2015-10-12 00:37:59
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syhzlsd

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
997821428: 金币+10, ★有帮助 2015-10-13 13:46:33
取菌液离心，6000rpm，5min，去掉上清；
沉淀加入0.5ml ddH2O,离心6000rpm，5min，去掉上清（洗去培养基）；
沉淀加入70ul 2*loading buffer（loading buffer的量根据沉淀量而定），煮样，100度，25min；
离心，6000rpm，3min；
上清点样，5-6ul就可以。
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2楼2015-10-12 17:05:38
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love犬夜叉

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

其实可直接跑电泳的，直接取菌液按比例加入loading buffer ，煮样，上样都跟蛋白样品一样就可以了，也可以离心一次取上清洗涤一下，其他的步骤一样。
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justloveinuyasha
3楼2015-10-15 16:08:52
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