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[求助]
关于转座子pAG408
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求问，有没有大神用过转座子pAG408的，话说这个温度敏感型的质粒转到目的菌中之后，升温使质粒转座到基因组上的具体操作是什么样的呀，是不是跟受体菌的种类也有关系？ 1. 升温转座的温度是不是37-42度都可以？ 2. 升温转座的时候要不要加微量的红霉素呀，因为有的文献中说微量的红霉素可以促进转座酶的表达？ 3.受体菌要先在30度中养几个小时之后再升温转座么？ 4. 受体菌转座之后再有抗生素的培养基中长得慢了好些，是正常的么？ 4. 升温转座之后的筛选突变子有没有比较简便的方法？是不是只能是挑选不能在卡纳中长，可以在红霉素中长的？ 5.或者有没有其他比较好用的用于G+菌突变的转座子 谢谢各位了，因为这个突变也是困扰好久好久了，跪求指导～ |
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