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wy8611meng

木虫 (正式写手)

[交流] 蛋白沉淀法处理的样品，应如何计算回收率

蛋白沉淀法处理的样品，应如何计算回收率

目前我在做一种药物的HPLC检测，采用蛋白沉淀法处理样品，那么方法确证时应如何计算回收率啊？
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1楼 2008-09-04 13:58:25
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corrinejiang

金虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
分子是经过处理的，也就是按照正常样品处理方法做出来的，分母这样做：加入纯溶液，吹干，再加入沉淀后的血浆上清，涡旋，吹干不吹干看你方法是否需要了，原则就是避免了沉淀蛋白那一步。高中低浓度做5份，分母取5份的平均。做峰面积比
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2楼2008-09-04 16:00:44
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wy8611meng

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by corrinejiang at 2008-9-4 16:00:
分子是经过处理的，也就是按照正常样品处理方法做出来的，分母这样做：加入纯溶液，吹干，再加入沉淀后的血浆上清，涡旋，吹干不吹干看你方法是否需要了，原则就是避免了沉淀蛋白那一步。高中低浓度做5份，分母取 ...

请问纯溶液是指什么？
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3楼2008-09-04 21:09:33
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elevern

★ ★
wy8611meng(金币+2,VIP+0):非常感谢！
那要看你做的是什么回收率了，有没有加内标，是算绝对回收率还是相对回收率，这个算法是不一样的。建议你去看李好枝新版的《体内药物分析》，讲得非常详细了
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4楼2008-09-05 22:29:35
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清水兰

铜虫 (初入文坛)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！
加入内标做法
算绝对回收率
回样做法：含药血浆+沉淀试剂   涡旋离心后取尽上清液加入内标，是否需要再浓缩，根据实际需要再往后做
回对做法：空白血浆+沉淀试剂  涡旋离心后取尽上清液加入与回样浓度相同的标液，内标，后续同回样做法。
回收率计算两者比值：回样（样品面积/内标面积）/回对（样品面积/内标面积）
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5楼2008-09-07 20:57:55
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