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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 硫酸盐盐矿样品中分离放线菌遇到的棘手问题
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方仗

新虫 (初入文坛)

[求助] 硫酸盐盐矿样品中分离放线菌遇到的棘手问题 已有1人参与

最近我从石膏矿中分离放线菌，应该属于从岩盐样品，分菌结果是90%都是芽孢杆菌，所以我想问有没有朋友从这方面的样品中分过菌，是样品中本来就有这么多芽孢杆菌，还是我操作失误导致污染了？
样品属于硫酸盐和土壤两种物质互相堆叠起来的类型，分出的菌可以在有盐分的培养基和无盐分的培养基上生长，估计属于耐盐菌吧。
哪位有从硫酸盐矿中分离出放线菌的文献吗？我基本上没有找到。
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1楼 2015-10-09 18:30:53
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haloarchaeon

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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方仗: 金币+5 2015-10-11 20:32:26
1、从岩盐样品分离微生物，最关键的是要控制好盐度、碳源和氮源。如果芽孢杆菌多，可能是培养基中盐度低的原因。可以设置5%、10%、15%、20%等梯度。
2、关于岩盐放线菌的分离，可以参考云南大学李文均老师课题组（李老师现在到中山大学工作）的相关文章。主要是一些硕士、博士论文。可以去“知网”查。
3、我实验室是做嗜盐古菌的，有兴趣的话，我们可以合作分离岩盐嗜盐古菌。
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haloarchaeon
2楼2015-10-11 09:46:24
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方仗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by haloarchaeon at 2015-10-11 09:46:24
1、从岩盐样品分离微生物，最关键的是要控制好盐度、碳源和氮源。如果芽孢杆菌多，可能是培养基中盐度低的原因。可以设置5%、10%、15%、20%等梯度。
2、关于岩盐放线菌的分离，可以参考云南大学李文均老师课题组（ ...

谢谢，我第一次分的时候就已经设置了盐浓度，大概在0——10%之间，因为我的样品是石膏矿，所以我直接加的是硫酸钙，可是在10%的平板上只长了很多芽孢杆菌，这是为什么呢？
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3楼2015-10-11 20:32:08
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haloarchaeon

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 方仗 at 2015-10-11 20:32:08
谢谢，我第一次分的时候就已经设置了盐浓度，大概在0——10%之间，因为我的样品是石膏矿，所以我直接加的是硫酸钙，可是在10%的平板上只长了很多芽孢杆菌，这是为什么呢？...

1、你说的盐浓度是硫酸钙的浓度吗？如果是硫酸钙，建议还是用氯化钠、硫酸镁替代，总盐度设置为5%、10%、15%、20%等梯度，碳源、氮源可用可溶性淀粉、微量酵母粉，也可用硝酸盐。总之，高氏1号的高盐版本，来尝试分离放线菌。
2、芽孢杆菌过多，可能是培养基盐度的原因，盐度高了，可能会少些。但好多中度嗜盐菌都产芽孢。
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haloarchaeon
4楼2015-10-12 13:59:07
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方仗

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by haloarchaeon at 2015-10-12 13:59:07
1、你说的盐浓度是硫酸钙的浓度吗？如果是硫酸钙，建议还是用氯化钠、硫酸镁替代，总盐度设置为5%、10%、15%、20%等梯度，碳源、氮源可用可溶性淀粉、微量酵母粉，也可用硝酸盐。总之，高氏1号的高盐版本，来尝试分 ...

我用硫酸钙的原因主要是石膏的主要成分就是硫酸钙，想模仿下它的生存环境。用氯化钠或者其他盐类可以达到筛选出石膏中嗜盐或者耐盐放线菌的目的吗？
我的盐浓度最高是10%，您的意思是再提高一下盐浓度？可是，我在10%的板上观察到只有芽孢杆菌，浓度低一些的板上还是会有其他的菌的，再提高的话会有其他菌出现吗？
我想我的样品应该是耐盐菌，从盐浓度较高的板上分离出的菌在不加盐的板上也可以长出来。
现在我所担心的就是，我所分离出的这么多芽孢杆菌是本身就存在于样品中还是说是由于我操作失误？从您的经验来看，从这一类的岩盐样品中分离，有这么多的芽孢杆菌正常吗？
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5楼2015-10-12 18:26:09
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20093651

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by haloarchaeon at 2015-10-11 09:46:24
1、从岩盐样品分离微生物，最关键的是要控制好盐度、碳源和氮源。如果芽孢杆菌多，可能是培养基中盐度低的原因。可以设置5%、10%、15%、20%等梯度。
2、关于岩盐放线菌的分离，可以参考云南大学李文均老师课题组（ ...

这是哪位？我也是微生物所的=￣ω￣=

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但行好事，莫问前程
6楼2015-10-12 18:57:24
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haloarchaeon

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
方仗: 金币+5 2015-10-13 09:49:01
引用回帖:
5楼: Originally posted by 方仗 at 2015-10-12 18:26:09
我用硫酸钙的原因主要是石膏的主要成分就是硫酸钙，想模仿下它的生存环境。用氯化钠或者其他盐类可以达到筛选出石膏中嗜盐或者耐盐放线菌的目的吗？
我的盐浓度最高是10%，您的意思是再提高一下盐浓度？可是，我在 ...

1、提高盐度可能会抑制芽孢杆菌的生长，但也只能试了才知道。按照我的经验，提高盐度，会有不同的菌，但样品不能在-20度冻过。
2、10%左右的，芽孢杆菌是不少。
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haloarchaeon
7楼2015-10-12 22:14:14
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