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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 溶液内酶解方法
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xfyz102

铜虫 (小有名气)

[求助] 溶液内酶解方法

做蛋白质谱鉴定，以前做的都是胶内酶解，现在有一个纯的样品，是单一酶的冻干样品，不需要跑胶在次分离，想问一下各位做过的老师同学如果不跑胶直接做胶内酶解应该怎么进行。 咨询了一些同行，一是：6M 盐酸胍溶解样品，加DTT还原、加IAA烷基化、超滤脱盐酸胍、加胰酶15h酶解， 质谱分析； 二是：6M 尿素溶解样品，加DTT还原、加IAA烷基化、加胰酶15h酶解。
     以上两个方法都没有依据，所以想请教一下有经验的老师们用的protocol是什么，能不能给个完整版最好附带出处来源的，50金币感谢，在多些也可以。
     谢谢！！！
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云大好政治哦。
1楼 2015-10-08 16:55:13
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jiafeijiafei

金虫 (小有名气)
楼主好，我最近开始做蛋白质组学，可是是新手，不是太懂。想咨询你一下做胶内酶切和溶液内酶切的protocol，不知道放不方便
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2楼2016-08-26 17:46:17
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