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胡程

银虫 (小有名气)

[求助] 小抽质粒od260/280比值问题已有1人参与

按照小抽质粒试剂盒protocol抽的质粒,几个质粒出现od260/280为1.43、1.71、1.82、1.63、1.95。进行trouble shooting时找不到原因,大家能否按照自己的经验给分析一下。谢谢了!
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做最好的自己
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匿名

用户注销 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
胡程: 金币+1, 有帮助, 谢谢你的参与,期待更多专业分析 2015-10-07 21:09:50
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2楼2015-10-07 16:23:48
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胡程

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 楚云猛 at 2015-10-07 16:23:48
应该是在沉淀蛋白质的那一步没有沉淀完全,让溶液充分混合试试

谢谢,蛋白污染是这一步,关键太高不是RNA 污染吗?怎么破
做最好的自己
3楼2015-10-07 18:49:43
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匿名

用户注销 (著名写手)

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4楼2015-10-08 11:40:32
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胡程

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 楚云猛 at 2015-10-08 11:40:32
有RNA的话,把质粒提出来放个一两天就差不多应该没有了,如果着急用的话,如果着急用的话,可以在沉淀完蛋白质后,向溶液中加入1ul的RNA酶处理五分钟,...

谢谢,我想着是P1里面的RNA酶失效了
做最好的自己
5楼2015-10-08 12:21:25
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jackyoung

新虫 (正式写手)

测定是用nanodrop还是分光光度计?
后者要考虑溶剂及pH
最好告诉我230比值
乙醇污染也会影响

发自小木虫Android客户端
CestLaVie
6楼2015-10-08 12:25:26
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8638600

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 胡程 at 2015-10-08 12:21:25
谢谢,我想着是P1里面的RNA酶失效了...

怀疑失效了可以自己另买一点rna酶加进去,反正又不贵
7楼2015-10-09 10:22:35
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胡程

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jackyoung at 2015-10-08 12:25:26
测定是用nanodrop还是分光光度计?
后者要考虑溶剂及pH
最好告诉我230比值
乙醇污染也会影响

nanodrop,我没有记这些参数,上面的各参数代表什么意义?求大神赐教
做最好的自己
8楼2015-10-09 18:27:46
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湘西小伙儿

金虫 (正式写手)

9楼2015-10-09 22:08:46
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