| 查看: 815 | 回复: 0 | ||
lggd2013银虫 (初入文坛)
|
[求助]
RT-PCR
|
 这是总RNA电泳图（非变性琼脂糖凝胶电泳） 用omega总RNA试剂盒提取  这从右到左分别是cDNA、PCR产物1、PCR产物2、PCR产物3（非变性琼脂糖凝胶电泳） PCR产物1、2、3是相同的锚定引物，不同随机引物 RT反转录是omega的M-MLV First Strand cDNA Synthesis Kit 体系为（试剂盒说明书）：总RNA 1ul oligo（dT）15 1ul 10mM dNTP mix 1ul Nuclease-Free Water 15ul 65度孵育5分钟，冰上速冷2分钟以上 5×RT Buff 5ul M-MLV Reverase Transcriptase 1ul RNase Inhibitor 1ul 42度反应60分钟 ，85度反应5分钟完成 PCR 3dH2O 20ul 模板cDNA 2ul 锚定引物 1ul 随机引物 1ul taq master mix 6ul 混匀后 95℃ 预变性 5min 95℃ 变性 45s 42℃ 复性 45s }40循环 72℃ 延伸 90s 分子小白求问总RNA和cDNA质量怎么样？PCR产物怎么样？PCR效果与退火温度关系怎么样？如何优化PCR参数与体系？ |
回复此楼» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有111人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有15人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
