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[求助]
植物病理学，最近要做胼胝质染色，然而查了很多文献都查不到 已有1人参与
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| 大概流程是要接细菌到植株上然后在不同时间段进行胼胝质染色，然而想法是好的，具体步骤和溶液配制在文献上都不好找。。。而且各不相同，做过的大神有可以给个助攻的么。。。。先谢谢了 |
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【答案】应助回帖
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我做过叶片的，看看你的染色时间够不够 FAA做固定 (formaldehyde-acetic acid-alcohol): 35 % H2O (17.5 ml), 50 % ethanol (25 ml 100% ethanol), 5 % glacial acetic acid (2.5 ml), 10 % formaldehyde (5 ml), TOXIC 染色溶液 staining solution: 0.01% aniline blue (5 mg) in 67 mM K2HPO4 pH12 (50 ml) 要得准确最好配制母液再稀释 侵染后固定 • after 24h of fixation remove FAA • carefully wash tube with 100 % ethanol • add 500 μl 100 % ethanol to the tube, tubes can now be stored for weeks 染色: • remove 100 % ethanol • add 500 μl 50 % ethanol, incubate for 30 min on the bench • remove ethanol again • add 500 μl 67 mM K2HPO4 (pH 12), incubate for 30 min • remove K2HPO4 • add 500 μl staining solution, incubate for 1h in the dark • prepare object slides with 25 μl mounting solution, carefully transfer plants with thin forceps onto the slides and cover with cover glasses • perform UV microscopy at the upright microscope (filter set 1) |
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