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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » JNK激酶活性检测问题
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倩女

金虫 (正式写手)

[求助] JNK激酶活性检测问题 已有1人参与

第一次检测激酶活性，但是最后WB总是检测不到p-c-jun的条带，用的是CST 的JNK kinase assay kit，有哪位前辈做过，希望不吝赐教！
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1楼 2015-10-06 06:37:17
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djbitter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
倩女: 金币+3, ★★★很有帮助 2015-10-07 01:32:59
没用过这个抗体，但CST其它抗体感觉效果不错。可以加一个明显磷酸化的阳性对照；有没有测c-jun，看其蛋白水平；严格按照说明书的使用条件；样品制备过程中磷酸酶抑制剂是否加了，是否有效，样品保存最好冻存。
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2楼2015-10-06 21:15:52
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倩女

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by djbitter at 2015-10-06 21:15:52
没用过这个抗体，但CST其它抗体感觉效果不错。可以加一个明显磷酸化的阳性对照；有没有测c-jun，看其蛋白水平；严格按照说明书的使用条件；样品制备过程中磷酸酶抑制剂是否加了，是否有效，样品保存最好冻存。

是严格按照说明书来做的，加了抑制剂的。还在寻找原因中，谢谢你的回复！
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3楼2015-10-07 01:32:41
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