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求助:关于载体构建
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我现在要用丝状噬菌体构建表达载体,问题如下: 1.目的片段放在哪里?应该放在基因与基因间隔区吗还是选个不太重要的基因插入? 2.表达出来的蛋白是什么形态?如果目的片段是插在某个基因当中,是不是表达出来的蛋白就是融合蛋白,纯化困难? 3.由于噬菌体本身会表达蛋白,是不是用已经存在的启动子就可以了,不用另外加入启动子? 4.查到的文献基本上都是在已有载体基础上改善的,没查到用野生质粒或噬菌体构建载体的,急切想得到这方面的文献资料。 5.从野生噬菌体构建能表达的表达载体,过程需要多久? 希望大家解答,在此谢过 |
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