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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 蛋白挂在阳离子交换柱上洗脱不下来，怎么办？
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ssy2014

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白挂在阳离子交换柱上洗脱不下来，怎么办？ 已有4人参与

如题~求助！

另外想问一下，阳离子交换柱和阴离子交换柱的洗脱原理不一样吗？我用的是缓冲剂加1M NaCl梯度洗脱的
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1楼 2015-09-29 21:08:40
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ssy2014: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2015-11-30 16:54:01
你用的什么填料啊？
1.换弱阳的琼脂糖凝胶介质试试，比如由sp的换成CM的。1M氯化钠洗不下来就继续加大。
2.阴阳历和阴离子交换层析的洗脱原理一样，都是电荷竞争替换过程。祝顺利。
3.若洗不下来的是杂蛋白直接用0.1M氢氧化钠洗好了。
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2楼2015-09-30 09:02:37
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古月问你哦

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ssy2014: 金币+5, ★★★很有帮助 2015-11-30 16:54:16
楼上的处理方式可行，
但不知道你是直接上样还是孵育的，但你可以减少离子柱与样品结合的时间，防止蛋白沉在柱上。
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我就是我，是不一样的烟火
3楼2015-09-30 09:37:55
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2015-10-01 20:08:10
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mao877516786

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 古月问你哦 at 2015-09-30 09:37:55
楼上的处理方式可行，
但不知道你是直接上样还是孵育的，但你可以减少离子柱与样品结合的时间，防止蛋白沉在柱上。

刚刚接触蛋白纯化，减少离子柱与样品的结合时间，防止蛋白沉在柱上，可不可以详细解释一下。拜谢！
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5楼2015-10-10 08:37:18
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mao877516786

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 穿白大褂约会 at 2015-10-01 20:08:10
建议用重力柱，上样流速不要太慢，NaCl浓度还可以增加。

上样流速慢了会有什么问题么
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6楼2015-10-10 08:38:04
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
7楼2015-10-11 11:12:52
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实验达人黄

禁言 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
8楼2015-11-01 12:37:55
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穿白大褂约会

禁言 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
9楼2015-11-01 23:34:22
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实验达人黄

禁言 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
10楼2015-11-03 18:07:52
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