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99蜗牛99

新虫 (小有名气)

[交流] 提取酵母基因组时所需的1:1的苯酚/氯仿试剂是怎么配置的,求教。。。。

提取酵母基因组时所需的1:1的苯酚/氯仿试剂是怎么配置的,求教。。。。
(1)        取1mL30℃,200rpm过夜活化的菌液,10000rpm离心1min,弃上清;
(2)        0.5mL无菌水重悬菌体,离心弃上清;
(3)        加入0.2mL破菌缓冲液,与菌体等体积的玻璃珠和0.2mL酚/氯仿,涡旋振荡5min;
(4)        加入0.2mLTE Buffer,快速振荡,高速离心5min;
(5)        吸取上清转移至新的离心管,加入0.2mL酚/氯仿,重复抽提至无中间沉淀相;
(6)        加入1mL无水乙醇,颠倒混匀;
(7)        12000rpm离心5min,弃上清,沉淀用50μL TE缓冲液或水溶解;
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