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凡尔赛小玫瑰

木虫 (正式写手)

[交流] 血清抽滤的问题

本人最近要做实验,血清要进行抽滤,因为以前从来没有抽滤过血清,所以来请教下经验。我抽滤步骤是滤纸,0.45,0.22这么3步。
血清抽滤会不会产生大量气泡,如何让气泡少产生甚至不产生?
抽滤中会不会堵塞滤膜?如何防止滤膜堵塞?
泵的压力要控制在大点好,还是小点好?速度慢点无所谓,不要产生浪费,或者抽滤失败就成。
抽滤设备是否要先灭菌,可是我只有一个设备,要抽3次的话每次都灭菌有点不现实呢!如何尽量保证血清无菌呢?
请有经验的前辈传授下经验!谢谢
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2楼2015-09-29 10:09:25
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
凡尔赛小玫瑰: 金币+5, 谢谢回复 2015-09-29 10:48:39
做过这个实验!建议:
先高速离心,最好转速10000以上,离心20分钟,然后上清过0.45,在过0.22.就差不多了。直接用无菌膜过滤,尽量在无菌环境中操作,与你处理量有关。
3楼2015-09-29 10:41:41
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凡尔赛小玫瑰

木虫 (正式写手)

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3楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-29 10:41:41
做过这个实验!建议:
先高速离心,最好转速10000以上,离心20分钟,然后上清过0.45,在过0.22.就差不多了。直接用无菌膜过滤,尽量在无菌环境中操作,与你处理量有关。

谢谢你的回复,可是我的血清量很大呀,2L的 量,离心的话量太多了,工作量太大,3.5ml一管,有上千管呢,而且血清不能长时间在室温下存放的吧?新鲜的血清放在4度冰箱也是只能放一个星期左右吧?
4楼2015-09-29 10:48:01
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hc-material

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼: Originally posted by 凡尔赛小玫瑰 at 2015-09-29 10:48:01
谢谢你的回复,可是我的血清量很大呀,2L的 量,离心的话量太多了,工作量太大,3.5ml一管,有上千管呢,而且血清不能长时间在室温下存放的吧?新鲜的血清放在4度冰箱也是只能放一个星期左右吧?...

恩恩,可以用好大点的离心机啊
5楼2015-09-29 11:22:33
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hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼: Originally posted by 凡尔赛小玫瑰 at 2015-09-29 10:48:01
谢谢你的回复,可是我的血清量很大呀,2L的 量,离心的话量太多了,工作量太大,3.5ml一管,有上千管呢,而且血清不能长时间在室温下存放的吧?新鲜的血清放在4度冰箱也是只能放一个星期左右吧?...

有4度温控离心机,2升一次就离完了,看来实验室条件不一样。爱莫能助。祝福。
6楼2015-09-29 11:24:46
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凡尔赛小玫瑰

木虫 (正式写手)

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6楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-29 11:24:46
有4度温控离心机,2升一次就离完了,看来实验室条件不一样。爱莫能助。祝福。...

是啊,在请教个问题,国产的微孔滤膜怎么灭菌呢,用121℃,15min灭菌会不会变形,孔径会不会改变?要放在哪里?只用报纸或牛皮纸包起来可以吗?我只有一套抽滤设备,要是装在抽滤装置里那只能用一次啊,能不能灭好,然后换滤膜这样,还有灭完菌要干燥吗?滤膜怎么使用,使用的时候要先打湿吗?
7楼2015-09-29 12:01:43
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hc-material

专家顾问 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
没用过,不懂,只用过实验室那种一次性的。祝顺利。
8楼2015-09-29 17:29:25
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