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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pPIC9K连接
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397608492

新虫 (小有名气)

[求助] pPIC9K连接 已有1人参与

如题，用pPIC9K连接一个1700bp的片段，用Xho I和EcoR I双酶切之后连接，结果kanamycin平板上只长几个点，还都是空载，重复了好几次都不行，人都要崩溃了。求指点一下好方法。

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1楼 2015-09-28 18:50:21
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风悠子123

新虫 (初入文坛)
我现在也遇到这种情况呢，可能是空载或者载体自连，现在还在摸索条件，请问你做成功了吗？
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2楼2015-10-08 15:43:04
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tolobio

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
myprayer: 金币+1, 鼓励发帖积极交流。 2015-10-16 20:16:16
建议送到公司做，速度快、价格还不贵，不成功不收费：http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=110
仅供参考！
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3楼2015-10-15 12:29:56
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397608492

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 风悠子123 at 2015-10-08 15:43:04
我现在也遇到这种情况呢，可能是空载或者载体自连，现在还在摸索条件，请问你做成功了吗？

其实是pPIC9K上不能用'Xho I，因为kanamycin里面有一个，你换一个酶切位点就好了，我现在都表达出来了呢。

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4楼2015-10-16 18:05:32
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sea4on

新虫 (小有名气)
您好，我做pPIC9的连接也一直不成功，请问您当时是怎么解决的呢？
谢谢！
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5楼2017-05-24 21:18:34
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sea4on

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 397608492 at 2015-10-16 18:05:32
其实是pPIC9K上不能用'Xho I，因为kanamycin里面有一个，你换一个酶切位点就好了，我现在都表达出来了呢。
...

您好，我做pPIC9的连接也一直不成功，请问您当时是怎么解决的呢？
谢谢！
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6楼2017-05-24 21:23:00
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