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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lovettzz

[交流] 请教内皮细胞的原代培养

目前,我正在做人脐静脉的原代培养,已经进行了4次,但是都没有成功,想请教一下做过的大侠。我在做的过程中发现的问题:
1.从医院取回的脐带,只有第一次的脐带是一根血管的,其余3次取回的都有两根血管互相缠绕的,导致我消化的时候不知道该怎么办,最终还是只选择了其中一根冲得比较干净的血管来消化;
2.有两次实验结果有细胞长出,其中有一次长出的下拨数量还可以,但是形态是长梭形的,不像内皮细胞;另一次,还没等细胞长满就全部死了。

我采用的方法是一般文献上查到的方法,用的是胰酶消化,1640培养基培养,只是没有加生长因子。
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lovettzz

谢谢楼上的hzxizh,我可能是因为消化液的量没有掌握好。再试试,不过做原代几次我都没有加抗生素,最长时间有培养至20几天的,也没有污染。
4楼2008-09-06 15:44:41
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lovettzz

???没人做过啊。。。
2楼2008-09-03 21:18:43
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hzxizh

铁杆木虫 (正式写手)

1.要求护士在取出是马上两端结扎,防止污染;
2.最好让她们给你稍加处理:冲洗血滞、缓冲液冲洗和浸泡;
3.带回后尽量选取粗大的一段,方便操作,降低污染;
4.消化液不宜过多,以浸润内皮层为宜,内皮细胞会自动分离和游离;过多容易得到多余的副产品----你的梭形细胞应属于此
5.原代培养时一定要加抗生素......
3楼2008-09-04 10:13:02
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