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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请问对于反相色谱来说，增加流动相中水的比例，一定可以增加分离度吗？
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skcwj

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问对于反相色谱来说，增加流动相中水的比例，一定可以增加分离度吗？ 已有8人参与

请问对于反相色谱来说，增加流动相中水的比例，一定可以增加分离度吗？流动相是乙腈和磷酸水按比例混合，要想把这2个分离好，增加磷酸水比例会有效果吗？

请问对于反相色谱来说，增加流动相中水的比例，一定可以增加分离度吗？


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1楼 2015-09-28 15:49:14
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放花如雪

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
xl_pro: 金币+1, 感谢您的应助，辛苦了。 2015-09-28 18:31:20
不是一定的，在一些色谱柱中，增加水相的比例反而减弱分离。这和你的色谱柱有关，一般的C18色谱柱系统下是增加水相可以增加分离。
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2楼2015-09-28 16:56:05
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不一定，看你的色谱图估计是分顺反异构体吧？该不是啥农药吧？可以的话，试试正相色谱吧。

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3楼2015-09-28 18:42:00
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Lespair

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小菜鸟第一次回答：不一定吧。
正好前几天也遇到类似的情况，分离度不够，问加水或者减流速可以嘛？领导说不行，然后就换柱子了。
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4楼2015-09-28 20:03:45
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不一定。降低有机相，降低流速是会增加保留时间，但同时也会让峰变宽。净效果不一定更好。

试试换缓冲体系，改pH，改溶剂（比方甲醇），改温度，另外有条件的换柱子。

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5楼2015-09-28 21:39:52
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实分得还可以了，降低进样量，降低温度，使用长色谱柱试试看。
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归零
6楼2015-09-28 21:57:12
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skcwj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by superyeast at 2015-09-28 21:39:52
不一定。降低有机相，降低流速是会增加保留时间，但同时也会让峰变宽。净效果不一定更好。
试试换缓冲体系，改pH，改溶剂（比方甲醇），改温度，另外有条件的换柱子。
...

Ph值要调低还是调高吗呢？

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7楼2015-09-29 08:13:13
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skcwj

新虫 (初入文坛)
上半年同样的色谱条件，这两个出峰时间大概相差2分钟了，现在只有半分钟了，不知道这又是什么原因

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8楼2015-09-29 08:22:15
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
第一个问题，大家都回答是不是。第二个首先你要确定这个是两个化合物，第二要确定这根柱子能够将他们分开，其次才是流动相。不过如果你知道这两个的结构的话，可以画出来，这个帮助更大。
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9楼2015-09-29 08:26:59
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da1234mao

铁虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2015-09-28 18:42:00
不一定，看你的色谱图估计是分顺反异构体吧？该不是啥农药吧？可以的话，试试正相色谱吧。

这个也能看出俩，强认
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10楼2015-09-29 08:33:44
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