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skcwj

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问对于反相色谱来说,增加流动相中水的比例,一定可以增加分离度吗? 已有8人参与

请问对于反相色谱来说,增加流动相中水的比例,一定可以增加分离度吗?流动相是乙腈和磷酸水按比例混合,要想把这2个分离好,增加磷酸水比例会有效果吗?

请问对于反相色谱来说,增加流动相中水的比例,一定可以增加分离度吗?


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放花如雪

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
xl_pro: 金币+1, 感谢您的应助,辛苦了。 2015-09-28 18:31:20
不是一定的,在一些色谱柱中,增加水相的比例反而减弱分离。这和你的色谱柱有关,一般的C18色谱柱系统下是增加水相可以增加分离。
2楼2015-09-28 16:56:05
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不一定,看你的色谱图估计是分顺反异构体吧?该不是啥农药吧?可以的话,试试正相色谱吧。

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3楼2015-09-28 18:42:00
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Lespair

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
小菜鸟第一次回答:不一定吧。
正好前几天也遇到类似的情况,分离度不够,问加水或者减流速可以嘛?领导说不行,然后就换柱子了。
4楼2015-09-28 20:03:45
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不一定。降低有机相,降低流速是会增加保留时间,但同时也会让峰变宽。净效果不一定更好。

试试换缓冲体系,改pH,改溶剂(比方甲醇),改温度,另外有条件的换柱子。

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5楼2015-09-28 21:39:52
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
其实分得还可以了,降低进样量,降低温度,使用长色谱柱试试看。
归零
6楼2015-09-28 21:57:12
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skcwj

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by superyeast at 2015-09-28 21:39:52
不一定。降低有机相,降低流速是会增加保留时间,但同时也会让峰变宽。净效果不一定更好。
试试换缓冲体系,改pH,改溶剂(比方甲醇),改温度,另外有条件的换柱子。
...

Ph值要调低还是调高吗呢?

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7楼2015-09-29 08:13:13
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skcwj

新虫 (初入文坛)

上半年同样的色谱条件,这两个出峰时间大概相差2分钟了,现在只有半分钟了,不知道这又是什么原因

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8楼2015-09-29 08:22:15
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
第一个问题,大家都回答是不是。第二个首先你要确定这个是两个化合物,第二要确定这根柱子能够将他们分开,其次才是流动相。不过如果你知道这两个的结构的话,可以画出来,这个帮助更大。
9楼2015-09-29 08:26:59
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da1234mao

铁虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lifucheng at 2015-09-28 18:42:00
不一定,看你的色谱图估计是分顺反异构体吧?该不是啥农药吧?可以的话,试试正相色谱吧。

这个也能看出俩,强认
10楼2015-09-29 08:33:44
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