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新铜试剂测定还原型谷胱甘肽不显色
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我在用新铜试剂法测定GSH标准品时,加入新铜和硫酸铜混合的显色剂时不显色,请大神帮忙分析一下是怎么回事。具体步骤如下: 新铜试剂法测定 GSH .1 主要溶液的配制 (1)GSH 标准溶液 准确称取还原型 GSH 标准品 10mg ,溶解于适量二次蒸馏水中,定容至100mL,得到 0.1000g/L 的 GSH 标准溶液。 (2)显色剂 准确称取五水硫酸铜 0.0625g,以 20-30mL 水溶解,称取新铜试剂 135. 8mg,以 8mL 无水乙醇溶解,将配制好的硫酸铜溶液和新铜试剂溶液进行充分混合,用蒸馏水定容至 250mL,得到显色剂。 2 检测步骤 绘制标准曲线取 7 支洁净的 25mL 带塞比色管,分别准确移取 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mLGSH 标准溶液,再分别加入 3mL 显色剂,7mL 无水乙醇,并加蒸馏 水定容至 25mL,混匀,稳定 15min 后显色。用紫外分光光度计于 456nm 处,用空白试剂作参比,测定各溶液的吸光度,根据 GSH 质量浓度与吸光度之间的关系绘制标准曲线。 |
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