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fancy868

[交流] 基因扩增

我现在需要做的实验是转一个内源基因到玉米中去,该基因属于一个基因家族,mRNA长度为3000多bp,请问可不可以一次性扩增得到cDNA全序列,如何做?如何设计引物 ?还有就是请问一下转基因,一般是不是转的cDNA序列 ?

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:16 ]
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fancy868

请问你的QQ号码是多少,如果不介意的话,以后我有什么问题容易请教你,我的是:
303832521
5楼2008-09-03 09:15:40
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boouy

银虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
可以一次性扩增得到cDNA全序列:直接设计引物扩增。
如何设计引物?参加primer 3或者本论坛有关讨论。
转基因方面,如果做超表达,一般是转cDNA。
2楼2008-09-02 11:58:00
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fancy868

谢谢,我再问一下,转cDNA是转整个序列呢还是只要转ORF就可以了 ?
3楼2008-09-03 07:37:27
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boouy

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
xyklmu(金币+3,VIP+0):感谢答复
通常ORF即可,不过,有人说UTR序列影响转录和翻译,因此全长cDNA为更好的选择。设计引物的时候可以略微照顾一下UTR (启动子到ATG的距离长一点,如>50bp),特别是5'UTR,使得转录机器和翻译机器能有效接合。
4楼2008-09-03 08:50:27
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