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hittyman

铜虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质技术专题开版

由于蛋白质的提取,复性,纯化是很复杂的一门技术,要求开专题专门讨论蛋白纯化,色谱问题。希望版主能为本专题作出贡献的虫子加分。建议置顶


生物版第一个精华贴!该主题已被收录到大事记!  http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=94636&fpage=1

[ Last edited by fishery on 2005-6-8 at 09:40 ]
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BlueGuy

荣誉版主 (正式写手)

懒懒的小虫虫

引用回帖:
Originally posted by hittyman at 2005-6-6 09:21 AM:
请问有没有做过包涵体蛋白柱复性实验
我现在做一段带有GST融合基因的蛋白,总大小是34KD,三对二硫键,等电点7.3-7.5,在大肠杆菌中高表达,包涵体复性实验中,包涵体沉淀1g用100m l8M尿素,0.01MDTT溶解后,缓冲液 ...

不知你说的是没有活性是什么意思,是没有可溶蛋白还是没有生物学活性?没有生物学活性可能是因为原核表达没有蛋白翻译后修饰的原因。另外你可以试试谷光甘肽复性系统,在复性液中改变氧化型谷光甘肽和还原型的比例来复性,复性速度应尽可能的慢,尽可能在4度条件下复性,有助于保持蛋白的活力!
30楼2005-06-06 21:24:17
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hittyman

铜虫 (小有名气)

推荐一个色谱网站,下载很多课件。

★ ★ ★ ★
miRNA(金币+1):希望补充完整写的仔细点!!!
fishery(金币+3):生物版第一个精华贴!已被收录到大事记!http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=94636&fpage=1
amarsham色谱网站,相当多的课件可以下载,希望能对正在做纯化的虫子有所帮助。
http://www4.amershambiosciences. ... china_download_area
2楼2005-06-04 16:29:56
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miRNA

至尊木虫 (职业作家)

水王之王(愚愚学园管理员)

0.5

★ ★ ★
xbbxll(金币+3):多谢提供
蛋白质含量测定方法

[ Last edited by miRNA on 2005-6-4 at 16:49 ]
〖愚愚学园〗http://www.scifans.net免费代理|免费期刊|ezproxy|文献检索|学术资源|免费资源
3楼2005-06-04 16:47:47
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hittyman

铜虫 (小有名气)

蛋白复性美国专利一篇

★ ★
miRNA(金币+2):thx
蛋白质复性经典专利,上面有很多例子,包括很多柱复性的例子。对正在做复性的虫子很有帮助,是个参考。
4楼2005-06-04 16:55:38
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