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hittyman

铜虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质技术专题开版

由于蛋白质的提取,复性,纯化是很复杂的一门技术,要求开专题专门讨论蛋白纯化,色谱问题。希望版主能为本专题作出贡献的虫子加分。建议置顶


生物版第一个精华贴!该主题已被收录到大事记!  http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=94636&fpage=1

[ Last edited by fishery on 2005-6-8 at 09:40 ]
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hittyman

铜虫 (小有名气)

包涵体蛋白柱复性实验问题讨论

请问有没有做过包涵体蛋白柱复性实验
我现在做一段带有GST融合基因的蛋白,总大小是34KD,三对二硫键,等电点7.3-7.5,在大肠杆菌中高表达,包涵体复性实验中,包涵体沉淀1g用100m l8M尿素,0.01MDTT溶解后,缓冲液是tris-Cl。挂DEAE-sepharose FF离子柱(预先包涵体溶解液溶解),流速1/500柱体积,复性缓冲液是选择胱氨酸-半胱氨酸体系,梯度复性,用梯度混合器混合(6M尿素,20mMtris,3.6mM半胱氨酸,0.36mM胱氨酸,pH9.0,平衡过夜,洗脱。但是没有活性,不知道如何解决。
20楼2005-06-06 09:21:24
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hittyman

铜虫 (小有名气)

推荐一个色谱网站,下载很多课件。

★ ★ ★ ★
miRNA(金币+1):希望补充完整写的仔细点!!!
fishery(金币+3):生物版第一个精华贴!已被收录到大事记!http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=94636&fpage=1
amarsham色谱网站,相当多的课件可以下载,希望能对正在做纯化的虫子有所帮助。
http://www4.amershambiosciences. ... china_download_area
2楼2005-06-04 16:29:56
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miRNA

至尊木虫 (职业作家)

水王之王(愚愚学园管理员)

0.5

★ ★ ★
xbbxll(金币+3):多谢提供
蛋白质含量测定方法

[ Last edited by miRNA on 2005-6-4 at 16:49 ]
〖愚愚学园〗http://www.scifans.net免费代理|免费期刊|ezproxy|文献检索|学术资源|免费资源
3楼2005-06-04 16:47:47
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hittyman

铜虫 (小有名气)

蛋白复性美国专利一篇

★ ★
miRNA(金币+2):thx
蛋白质复性经典专利,上面有很多例子,包括很多柱复性的例子。对正在做复性的虫子很有帮助,是个参考。
4楼2005-06-04 16:55:38
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