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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hittyman

铜虫 (小有名气)

[交流] 蛋白质技术专题开版

由于蛋白质的提取，复性，纯化是很复杂的一门技术，要求开专题专门讨论蛋白纯化，色谱问题。希望版主能为本专题作出贡献的虫子加分。建议置顶


生物版第一个精华贴!该主题已被收录到大事记!  http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=94636&fpage=1

[ Last edited by fishery on 2005-6-8 at 09:40 ]
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1楼 2005-06-04 16:17:30
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hittyman

铜虫 (小有名气)

包涵体蛋白柱复性实验问题讨论

请问有没有做过包涵体蛋白柱复性实验
我现在做一段带有GST融合基因的蛋白，总大小是34KD，三对二硫键，等电点7.3-7.5,在大肠杆菌中高表达，包涵体复性实验中，包涵体沉淀1g用100m l8M尿素，0.01MDTT溶解后,缓冲液是tris-Cl。挂DEAE-sepharose FF离子柱（预先包涵体溶解液溶解），流速1/500柱体积,复性缓冲液是选择胱氨酸－半胱氨酸体系，梯度复性，用梯度混合器混合（6M尿素，20mMtris，3.6mM半胱氨酸，0.36mM胱氨酸，pH9.0,平衡过夜，洗脱。但是没有活性，不知道如何解决。
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20楼2005-06-06 09:21:24
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hittyman

铜虫 (小有名气)

推荐一个色谱网站，下载很多课件。

★ ★ ★ ★
miRNA(金币+1):希望补充完整写的仔细点！！！
fishery(金币+3):生物版第一个精华贴!已被收录到大事记!http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=94636&fpage=1
amarsham色谱网站，相当多的课件可以下载，希望能对正在做纯化的虫子有所帮助。
http://www4.amershambiosciences. ... china_download_area
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2楼2005-06-04 16:29:56
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miRNA

至尊木虫 (职业作家)

水王之王（愚愚学园管理员）

0.5

★ ★ ★
xbbxll(金币+3):多谢提供
蛋白质含量测定方法

[ Last edited by miRNA on 2005-6-4 at 16:49 ]
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〖愚愚学园〗http://www.scifans.net免费代理|免费期刊|ezproxy|文献检索|学术资源|免费资源
3楼2005-06-04 16:47:47
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hittyman

铜虫 (小有名气)

蛋白复性美国专利一篇

★ ★
miRNA(金币+2):thx
蛋白质复性经典专利，上面有很多例子，包括很多柱复性的例子。对正在做复性的虫子很有帮助，是个参考。
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4楼2005-06-04 16:55:38
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