| 查看: 2706 | 回复: 2 | ||
1012203014金虫 (正式写手)
|
[求助]
蛋白质中二硫键含量（或巯基含量）的测定
|
|
测定总巯基含量时，15 mg蛋白样品溶解于5 mL含8 M 尿素的Tris-Gly 缓冲液（0.086 M Tris, 0.09 M Gly 和 0.04 M EDTA, pH 8.0）。测定自由巯基含量时，15 mg样品溶解于5 mL不含尿素的上述Tris-Gly 缓冲液中，而后加入50 μL Ellman 试剂 （DTNB, 即5,5-二硫基双2-硝基苯甲酸溶于Tris-Gly 缓冲液，4 mg/mL），在25℃条件下保温反应60 min, 离心（5000 g, 15 min），上清液在412 nm 处测定吸光值，以含Ellman 试剂的Tris-Gly 缓冲液为空白对照。 巯基含量的计算公式如下： SH (μmol/g) = 73.53×A ×D/C 式中：A —除去试剂空白后样品的吸光度值 D—稀释倍数 C—样品浓度（mg/mL） 问题1：上述公式中稀释倍数D是怎么算的（具体的式子），如果完全按照上述方法是不是就是1？ 问题2：我测的物质为毛发固体样品，二硫键含量在350μmol/g附近，此种测试方法是否具有可行性 问题3：由于毛发样品中含有非水溶性蛋白，又没哟测量二硫键含量的更好的方法  |
回复此楼» 猜你喜欢
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有14人回复
-
基金评审意见有问题
已经有5人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有181人回复
-
根癌农杆菌A136
已经有1人回复
-
🔥颠覆认知｜缺镁，可能悄悄偷走你的好心情
已经有0人回复
-
安徽省基金今年为什么开始的这么晚，本子什么时候送审，各位大神有了解的吗
已经有3人回复
-
Invitation to Explore China's Qiming Talent Program
已经有2人回复
-
中国启明计划// China's Qiming Talent Program
已经有0人回复
-
【专题讨论】果糖代谢科普辨析：天然水果果糖不等同于添加果糖，适合营养实训教学案例
已经有0人回复
-
北京工商大学曹锦轩课题组招收2027年博士生
已经有206人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1012203014
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 334.1
- 散金: 31
- 红花: 3
- 帖子: 395
- 在线: 232.6小时
- 虫号: 1349300
- 注册: 2011-07-18
- 性别: GG
- 专业: 化学反应工程
2楼2015-09-25 20:35:29
3楼2016-02-03 09:15:55
