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无花草

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌介导植物病毒侵染性克隆侵染本氏烟不表现症状

各位虫友:
       大家好!小弟在做转基因,遇到了些问题,请各位有这方面经验的虫友帮忙解决下,给小弟指点迷津,卡在那儿都一年了,愁~小弟开门见山,下面陈述我遇到的问题:小弟做的植物病毒(双生病毒),用别人构建好的侵染性克隆(农杆菌),活化,制备重悬液,用注射接种的方法接种本氏烟,问题是本氏烟植株一直不能表现病毒该有的症状。侵染性克隆载体是别人构建好的,而且前期完全正常的,就后来我接手做就出现用这种农杆菌接种本氏烟不表现症状的情况,目前,唯一的验证措施就是,接种后20左右,PCR检测接种植株长出的新叶,能检测到病毒组分,说明克隆载体是转入进本氏烟植株了的,但就是一直不表现病毒的症状。
1.各位虫友,有遇到类似情况的,或者有这方面经验的,帮忙分析下原因。
2.我可以怎么做来确认可能的原因?
3.有没有可能跟本氏烟生长的环境、本氏烟品种有关?
小弟没有币了,恳请各位好心的虫友帮忙解答下,小弟感激不尽,您的解答或许对我的实验有莫大的帮助,谢谢~
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好好做实验,毕业找份好工作!
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wjj87412369

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
无花草: 金币+8, ★★★很有帮助 2016-05-23 15:38:42
哥们,问题解决了吗?构建好的载体是不是删除了双生病毒的转运蛋白和衣壳蛋白的编码序列?如果删除病毒就失去感染能力,不会组装,不产生症状?不知道对不对,
另外:请问你那有玉米条纹病毒和小麦 矮缩病毒吗?
2楼2015-12-04 15:57:27
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

3楼2017-04-30 00:00:47
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

构建好的侵扰性载体必须用乙磺酸活化后才有侵染活性并表现症状

发自小木虫Android客户端
4楼2017-05-11 12:42:08
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

5楼2017-05-11 12:42:33
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Zhibao1994

新虫 (小有名气)

我也在跟着老师做马铃薯的病毒。目前也在做质粒转化和酶切验证试验。

发自小木虫Android客户端
6楼2017-05-11 12:43:40
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qingzhenw

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Zhibao1994 at 2017-05-11 12:42:08
构建好的侵扰性载体必须用乙磺酸活化后才有侵染活性并表现症状

你好,请问为什么需要乙磺酸活化才行呀

发自小木虫IOS客户端
7楼2018-03-05 16:39:17
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qingzhenw

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Zhibao1994 at 2017-05-11 12:42:08
构建好的侵扰性载体必须用乙磺酸活化后才有侵染活性并表现症状

求参考文献,哪里说到用乙磺酸处理才有侵染活性的?

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-03-05 16:54:55
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