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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

[交流] 分子克隆相关 已有4人参与

大家好,我在做分子克隆方面的初步工作,现在遇到了问题,就是我用KOD酶做PCR,要P载体PCA,大概在6800bp左右,比较大,总是P不出来,问问各位有何高见!结果总是在5000左右跑出明亮的条带,7000左右有不明显的条带,望各位能指点一下,非常感激!
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dorecnu

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
TAKARA longTaq试试。
2楼2015-09-24 20:26:02
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-24 22:31:19
分2~3个片段进行PCR,用IN-FUSION克隆技术,一个星期不到就会出结果
3楼2015-09-24 21:08:44
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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dorecnu at 2015-09-24 20:26:02
TAKARA longTaq试试。

试过,也没有P出来
4楼2015-09-25 19:34:27
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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 高gaoeryang at 2015-09-24 21:08:44
分2~3个片段进行PCR,用IN-FUSION克隆技术,一个星期不到就会出结果

你好,我不太懂IN-FUSION克隆技术,能讲解一下吗?万分感谢!
5楼2015-09-25 19:36:02
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ronniec

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
plus还是fx,plus长片段不好扩。你是要改载体么?
6楼2015-09-26 09:58:14
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果你用kod-plus酶 在基因组上可能比较难扩,这个酶保真性好,但是扩增效率低 建议用KOD-FX
7楼2015-09-27 10:08:24
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 我的雅戈儿 at 2015-09-25 19:36:02
你好,我不太懂IN-FUSION克隆技术,能讲解一下吗?万分感谢!...

看说明书,takara就有,不难的
8楼2015-09-28 10:50:38
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