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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)

[交流] 分子克隆相关 已有4人参与

大家好，我在做分子克隆方面的初步工作，现在遇到了问题，就是我用KOD酶做PCR，要P载体PCA,大概在6800bp左右，比较大，总是P不出来，问问各位有何高见！结果总是在5000左右跑出明亮的条带，7000左右有不明显的条带，望各位能指点一下，非常感激！
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1楼 2015-09-24 17:34:02
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dorecnu

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
TAKARA longTaq试试。
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2楼2015-09-24 20:26:02
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-24 22:31:19
分2~3个片段进行PCR，用IN-FUSION克隆技术，一个星期不到就会出结果
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3楼2015-09-24 21:08:44
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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dorecnu at 2015-09-24 20:26:02
TAKARA longTaq试试。

试过，也没有P出来
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4楼2015-09-25 19:34:27
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我的雅戈儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 高gaoeryang at 2015-09-24 21:08:44
分2~3个片段进行PCR，用IN-FUSION克隆技术，一个星期不到就会出结果

你好，我不太懂IN-FUSION克隆技术，能讲解一下吗？万分感谢！
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5楼2015-09-25 19:36:02
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ronniec

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
plus还是fx，plus长片段不好扩。你是要改载体么？
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6楼2015-09-26 09:58:14
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
★
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如果你用kod-plus酶 在基因组上可能比较难扩，这个酶保真性好，但是扩增效率低 建议用KOD-FX
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。
7楼2015-09-27 10:08:24
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高gaoeryang

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 我的雅戈儿 at 2015-09-25 19:36:02
你好，我不太懂IN-FUSION克隆技术，能讲解一下吗？万分感谢！...

看说明书，takara就有，不难的
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8楼2015-09-28 10:50:38
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