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坏蛋不2

金虫 (小有名气)

[求助] ITC法:小分子滴定蛋白,确定有结合的小分子和蛋白,一定能滴出曲线吗? 已有2人参与

最近用小分子滴定蛋白,小分子和蛋白用其他方法确定有结合,但是用ITC试了不同的蛋白浓度,不同的化合物浓度,但是始终滴定不出曲线,放热也非常少,请教大神们,为何会出现这样的情况呢???蛋白是新提的,浓度没问题,蛋白效力也没问题的,小分子和蛋白溶液是匹配的
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SYMZJT

新虫 (初入文坛)

2楼2015-09-26 10:50:58
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YUANXIAXIA

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
坏蛋不2: 金币+2 2015-11-12 09:09:21
这说明小分子与蛋白的结合力比较弱,可以加大小分子浓度
3楼2015-10-22 08:13:28
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Sureking

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
坏蛋不2: 金币+8, ★★★很有帮助 2015-11-12 09:09:48
ITC是检测相互作用过程中的热量变化,如果结合热量变化小的话确实不容易检测。可以试一下表面等离子共振(SPR),SPR并不依赖于热量变化。
Sureking
4楼2015-10-28 08:25:22
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飞阳99

木虫 (小有名气)

你好,你的问题解决了吗?我最近做ITC和你一样的问题。
努力,就有收获。
5楼2016-01-23 14:57:41
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johnlenon40

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 飞阳99 at 2016-01-23 14:57:41
你好,你的问题解决了吗?我最近做ITC和你一样的问题。

可是试试使用MST(微量热泳动)检测,不依赖于热量变化,而且操作比SPR简单的多
6楼2016-02-03 16:22:08
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YUANXIAXIA

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

这说明蛋白和小分子的结合力比较弱,应该同时增大蛋白和小分子浓度
7楼2016-02-18 10:03:02
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heiheimao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Sureking at 2015-10-28 08:25:22
ITC是检测相互作用过程中的热量变化,如果结合热量变化小的话确实不容易检测。可以试一下表面等离子共振(SPR),SPR并不依赖于热量变化。

请问SPR有实验方法吗?我想测小分子与蛋白的相互作用
8楼2021-05-11 15:08:01
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