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馨-馨

银虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 测定胺类标准曲线问题

原理：利用TNBS和胺类物质形成络合物，溶于甲苯。
方法：取200ul 胺类标准液，标准液浓度分别为0ug/ml, 50ug/ml, 100ug/ml, 150ug/ml, 200ug/ml,  250ug/ml.
      200ul 1M  K2CO3 ;(提供碱性环境）
      200ul TNBS , 40℃，5min;
      用800ul  甲苯萃取，涡旋20s,2000rpm ,5min.
      取200ul 上层液体，340nm测吸光值。
问题：测了很多次，出来的值，线性很差，R值中只能出现一个9 ，请各位大神指教。
是反应体系太小了吗，还是什么原因？

可不可以提高胺类物质的浓度，反应体系不变，甲苯萃取后的液体，通过合适的梯度稀释，在用340nm测吸光值，该值能够用于标准曲线的绘制吗？
欢迎各位大神多多指导，本人菜鸟一名呀~！~！

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1楼 2015-09-23 16:57:23

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