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馨-馨银虫 (小有名气)
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[求助]
测定胺类标准曲线问题
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原理： 利用TNBS和胺类物质形成络合物，溶于甲苯。 方法：取200ul 胺类标准液，标准液浓度分别为0ug/ml, 50ug/ml, 100ug/ml, 150ug/ml, 200ug/ml, 250ug/ml. 200ul 1M K2CO3 ;(提供碱性环境） 200ul TNBS , 40℃，5min; 用800ul 甲苯萃取 ，涡旋20s,2000rpm ,5min. 取200ul 上层液体，340nm测吸光值。 问题：测了很多次，出来的值，线性很差，R值中只能出现一个9 ，请各位大神指教。 是反应体系太小了吗，还是什么原因？ 可不可以提高胺类物质的浓度，反应体系不变，甲苯萃取后的液体，通过合适的梯度稀释，在用340nm测吸光值，该值能够用于标准曲线的绘制吗？ 欢迎各位大神多多指导，本人菜鸟一名呀~！~！ |
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