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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 缓冲盐流动相如何设置
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pcok2010

铜虫 (小有名气)

[求助] 缓冲盐流动相如何设置 已有4人参与

本人用的是缓冲盐流动相为（NaAc,Na2EDTA,辛烷磺酸钠,10%甲醇混合），请问跑液相时候如何进行平衡，一般要平衡多久，进样后两个样品之间大概要平衡多久呢？最后如何将C18柱子冲干净呢？紧急求救啊，本人以前从未做过缓冲盐流动相的样品。
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1楼 2015-09-20 15:18:19
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xf000936

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pcok2010: 金币+3, ★有帮助 2015-09-24 14:31:36
之前我们也用过辛烷磺酸钠，平衡时间比一般的缓冲盐要长很多，第一次估计有3个小时左右，样品间隔要看性质，不好说，像我们的如果只是P-A的话平衡20min,residual差不多有1h多了，自己试试。
冲洗就用水/ACN或MeOH冲洗就可以了。
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忙啊~~~~
2楼2015-09-20 16:44:34
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pcok2010

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xf000936 at 2015-09-20 16:44:34
之前我们也用过辛烷磺酸钠，平衡时间比一般的缓冲盐要长很多，第一次估计有3个小时左右，样品间隔要看性质，不好说，像我们的如果只是P-A的话平衡20min,residual差不多有1h多了，自己试试。
冲洗就用水/ACN或MeOH冲 ...

是第一次平衡这么久吧，那之后冲洗完下次再用还要这么久吗？
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3楼2015-09-20 17:37:48
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xf000936

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by pcok2010 at 2015-09-20 17:37:48
是第一次平衡这么久吧，那之后冲洗完下次再用还要这么久吗？...

是的，重新置换肯定要平衡的。
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忙啊~~~~
4楼2015-09-20 17:41:13
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pcok2010

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xf000936 at 2015-09-20 17:41:13
是的，重新置换肯定要平衡的。...

你们的柱效怎么样了？是不是降得很快啊？
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5楼2015-09-20 18:13:15
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chl1982

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
初次平衡，基线平后，半小时就可以。两次之间平衡十到十五分钟就可以了。用完后，先用纯水80-90冲半小时到一小时吧，再用纯有机相冲二三十分钟吧

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6楼2015-09-20 20:50:58
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pcok2010

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by chl1982 at 2015-09-20 20:50:58
初次平衡，基线平后，半小时就可以。两次之间平衡十到十五分钟就可以了。用完后，先用纯水80-90冲半小时到一小时吧，再用纯有机相冲二三十分钟吧

”先用纯水80-90冲半小时到一小时吧，再用纯有机相冲二三十分钟吧“，这一步中间要梯度洗脱吗？
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7楼2015-09-21 11:04:15
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gyrydm0808

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by pcok2010 at 2015-09-21 11:04:15
”先用纯水80-90冲半小时到一小时吧，再用纯有机相冲二三十分钟吧“，这一步中间要梯度洗脱吗？...

这个可以设置梯度洗脱的，可以保护柱子
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8楼2015-09-21 12:33:11
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

超

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
pcok2010: 金币+3, ★有帮助 2015-09-24 14:32:01
我一般做都是先用大比例的水冲洗柱子半小时，然后换成流动相，跑样没什么太多要求，看着来就可以了，主要是清洗阶段，一定要长时间的清洗，不要以为压力降下去就没事了，一般都要洗很长时间！
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生活就是如此
9楼2015-09-21 15:42:33
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xf000936

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by pcok2010 at 2015-09-20 18:13:15
你们的柱效怎么样了？是不是降得很快啊？...

看样品吧，能接保护柱最好。
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忙啊~~~~
10楼2015-09-21 20:12:29
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