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打盹的毛毛虫

金虫 (小有名气)

[求助] 6*His标签一抗问题 已有2人参与

6*His标签一抗特异性强么?它只对6个连续组氨酸有特异性?还是对5个组氨酸或者4个组氨酸也有微弱特异性?
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归海逸凌

新虫 (初入文坛)

2楼2015-09-20 13:50:59
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)

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理论上完全有可能,实际情况得用5*His和4*His检测过后才知道
3楼2015-09-20 19:01:45
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

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打盹的毛毛虫: 金币+5 2015-09-22 15:14:13
根据本人经验,市面上所有卖的6*his抗体都是垃圾,包括很多大公司的抗体
特异性差,杂带多,有时候表达了带组氨酸标签的蛋白,我可以用镍柱富集却检测不到
完全不能理解为什么这些公司还在卖这些抗体,纯粹是坑人
如果想用标签做免疫就用flag, HA, myc之类的经典标签,最好不要用6*his图省事
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2015-09-21 03:03:08
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打盹的毛毛虫

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 归海逸凌 at 2015-09-20 13:50:59
杂带也还是有的!

嗯嗯 我也是检测到杂带了
5楼2015-09-22 15:12:27
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打盹的毛毛虫

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2015-09-21 03:03:08
根据本人经验,市面上所有卖的6*his抗体都是垃圾,包括很多大公司的抗体
特异性差,杂带多,有时候表达了带组氨酸标签的蛋白,我可以用镍柱富集却检测不到
完全不能理解为什么这些公司还在卖这些抗体,纯粹是坑人 ...

我是用his标签提膜蛋白 蛋白电泳偏大1万5左右 于是做了个抗6*his的western 能够检测到条带 现在比较难确定提出的蛋白是我的目的蛋白
还是杂蛋白
6楼2015-09-22 15:15:50
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