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多巴染色法观察黑色素实验的相关问题
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由于现在做的实验用到多巴染色后切片染色观察组织中的黑色素,现已初步弄清了实验方法,但还是有些细节不清楚。以下是我在文献上看到的方法,步骤如下: 在4%多聚甲醛中进行固定,组织浸于孵育液中1 h,更换孵育液继续孵育24 h,流水冲2~6 h;Bouin’s液重新固定24 h;先后用70%、80%、90%、95% 乙醇及无水乙醇进行脱水,二甲苯透明,石蜡包埋; 切片厚6 μm; 二甲苯脱蜡,再用无水乙醇及95% 、90% 、80% 、70% 乙醇脱水,0.1% 核固红染浸泡10 min,流水冲15 min; 先后用70%、80%、90% 、95% 乙醇及无水乙醇进行脱水、二甲苯透明,中性树胶封片。 其中的孵育液和Bouin‘s液已经在网上查到了配制方法,现在就是0.1%核固红染液不知怎么配,希望有经验的可以回下贴。关于实验中有要注意的地方也请大家不吝啬指出啦!谢谢啦! |
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