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dongniaoxin

铁杆木虫 (正式写手)

响当当的木头

[求助] QC微生物实验室的菌种保藏方法

微生物实验室常用的菌种有大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌,枯草芽孢杆菌,生孢梭菌,白色念珠球菌,黑曲霉和伤寒杆菌。现在为节约成本想要更改保存方法,以前是斜面保藏,保藏时间太短,现在想做甘油菌冻存,大肠埃希菌,金黄色葡萄球菌还有枯草芽孢杆菌操作起来应该不是难事,可是其他五种该怎么操作呢?请专业人士作答,最好能给出实验方案和保藏时间鉴定方法。感激不尽
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没有梦就走,没有错就不向谁低头
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guoshk

新虫 (初入文坛)

斜面保藏只能在4 oC下,实在保藏的时间太短,甘油冻存虽然时间会长一些,但效果也不好。就我所知,目前最好的保存方法是液氮保藏,或者是用10%-20%的DMSO(二甲基亚砜)保藏。尤其是用DMSO方法保藏菌种,方法简单,成本低,菌种存活的时间长,活性高。你可以用小的1ml的存菌瓶(小玻璃瓶有盖,我不知道国内是否有),加入1-200微升的DMSO,灭菌后备用,然后将你培养的液体菌液之间加入小瓶,不要装的太满,以免冷冻时瓶子破裂。在-70度下保藏4-5年不成问题,在-20度,1年左右应该没问题。你可以在每个月的1号用牙签从小瓶中取出少量,接种到适当的培养基上,在适当的温度下培养,观察菌种是否可以生长,以确定其活性。这样你就可以知道每种不同的菌在用DMSO保藏时可保藏的时间了,当然你同时最好用甘油保藏的做对照,比较两者的差异。经过一年后,你的记录甚至就可以写一篇小的论文了,而且很多人会从中受益。祝你好运!
2楼2015-09-17 22:40:12
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JerryJack

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guoshk at 2015-09-17 22:40:12
斜面保藏只能在4 oC下,实在保藏的时间太短,甘油冻存虽然时间会长一些,但效果也不好。就我所知,目前最好的保存方法是液氮保藏,或者是用10%-20%的DMSO(二甲基亚砜)保藏。尤其是用DMSO方法保藏菌种,方法简单, ...

所以大家有实验吗?我个人觉得不是特别重要的菌种,甘油保藏足够了,如果真的很重要,建议液氮保存

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3楼2020-09-21 06:28:19
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