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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 提取出来的RNA浓度低 OD值1.5几 求助
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aza_1230

新虫 (小有名气)

[求助] 提取出来的RNA浓度低 OD值1.5几 求助 已有3人参与

提取细胞中的RNA 提取出来的RNA用nanodrop测浓度100ng/ul左右 OD260/280值为1.56 做了好几次都这样 我怀疑有一下几个原因 不知道对不对 求分析
1. 新买的trizol有问题，离心后水相颜色发黄 不是无色的
2. 细胞数太少，RNA总值低，会不会导致OD比值低，这个我觉得可能性不大啊 但是求分析
提取出来RNA在风干乙醇后几乎看不到
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1楼 2015-09-17 18:42:32
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xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:36:37
1.加入trizol分层后，注意不要吸取过多上层白色液体，避免吸到下面的有机相（粉色）部分。
2.一般提取到异丙醇沉淀，离心20min后，应该有肉眼可见的RNA在离心管底部。
3.有时候数值不好，实验也能做出来。1.56的时候很少，也有过。你可以PCR看看质量，有无DNA污染
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偶时晴天偶时雨
2楼2015-09-17 19:11:45
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renzhiq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白污染，裂解液加少了，多加点可能会好些……

发自小木虫Android客户端
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3楼2015-09-17 19:25:09
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Trizol水相发黄还从未遇到过，如果不是你有点多虑，你是从什么来源提RNA？
你得说你一共得到了多少RNA，只知道浓度，没法判断，对于太少的RNA，比如总量在5μg以下，沉淀的时候需要加glycogen
另外，RNA没必要风干
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4楼2015-09-18 13:26:17
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xulei1221

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-18 13:26:17
Trizol水相发黄还从未遇到过，如果不是你有点多虑，你是从什么来源提RNA？
你得说你一共得到了多少RNA，只知道浓度，没法判断，对于太少的RNA，比如总量在5μg以下，沉淀的时候需要加glycogen
另外，RNA没必要风干

你好，我想问下我的RNA测得的比值每次都是1.1多点，加入乙醇也没有看到沉淀是为什么啊，麻烦您指教一下
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5楼2015-10-20 17:46:29
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