24小时热门版块排行榜    

查看: 4247  |  回复: 4

aza_1230

新虫 (小有名气)

[求助] 提取出来的RNA浓度低 OD值1.5几 求助 已有3人参与

提取细胞中的RNA 提取出来的RNA用nanodrop测浓度100ng/ul左右 OD260/280值为1.56 做了好几次都这样 我怀疑有一下几个原因 不知道对不对 求分析
1. 新买的trizol有问题,离心后水相颜色发黄 不是无色的
2. 细胞数太少,RNA总值低,会不会导致OD比值低,这个我觉得可能性不大啊 但是求分析
提取出来RNA在风干乙醇后几乎看不到
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoyanzi517

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-09-17 22:36:37
1.加入trizol分层后,注意不要吸取过多上层白色液体,避免吸到下面的有机相(粉色)部分。
2.一般提取到异丙醇沉淀,离心20min后,应该有肉眼可见的RNA在离心管底部。
3.有时候数值不好,实验也能做出来。1.56的时候很少,也有过。你可以PCR看看质量,有无DNA污染
偶时晴天偶时雨
2楼2015-09-17 19:11:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

renzhiq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白污染,裂解液加少了,多加点可能会好些……

发自小木虫Android客户端
3楼2015-09-17 19:25:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Trizol水相发黄还从未遇到过,如果不是你有点多虑,你是从什么来源提RNA?
你得说你一共得到了多少RNA,只知道浓度,没法判断,对于太少的RNA,比如总量在5μg以下,沉淀的时候需要加glycogen
另外,RNA没必要风干
4楼2015-09-18 13:26:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xulei1221

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-09-18 13:26:17
Trizol水相发黄还从未遇到过,如果不是你有点多虑,你是从什么来源提RNA?
你得说你一共得到了多少RNA,只知道浓度,没法判断,对于太少的RNA,比如总量在5μg以下,沉淀的时候需要加glycogen
另外,RNA没必要风干

你好,我想问下我的RNA测得的比值每次都是1.1多点,加入乙醇也没有看到沉淀是为什么啊,麻烦您指教一下
5楼2015-10-20 17:46:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 aza_1230 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +16 基诺咪客 2026-08-17 20/1000 2026-08-20 12:44 by 201120518022
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +16 Ldrop2023 2026-08-13 20/1000 2026-08-20 11:07 by xskun
[基金申请] 言之凿凿,8月21号(明天)放榜 +12 医学老男孩 2026-08-20 14/700 2026-08-20 10:53 by ran2233
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 21/1050 2026-08-20 10:37 by Vivilian
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见