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slshing

铁虫 (小有名气)

[交流] 科研合作:菌根学的突破性课题——AM真菌的分离和纯培养以及AM真菌的应用推广

菌根学的突破性课题:
    AM真菌的分离和纯培养以及AM真菌的应用推广
(一).用湿筛法从土壤中分离出AM真菌孢子,这些孢子可用来进一步纯化分离;
(二).需要对上述AM真菌孢子进行表面消毒处理,即孢子浸泡在2%的氯氨T和200mg/L链霉素溶液中15min,然后用无菌水冲洗多次为止,备用;
(三).培养基配方和配制
(1). NH4NO3            1650mg/L       CaCl2                 350mg/L
          KH2PO4             1000mg/L      MgSO4.7H2O      250mg/L
          ZnSO4.7H2O       20mg/L         蔗糖                    8000mg/L
         琼脂                     20000mg/L   蒸馏水                 800ml
        植物浸提液(即含有植物内生微生物群落的植物浸提液,需经过过滤灭菌器灭菌)     200ml
再经高压蒸汽灭菌,然后使其降温至摄氏60~70度,备用;
(2).      蛋白胨     5g/L      酵母浸粉      3g/L        硫胺素        10mg/L
加70ml蒸馏水混合均匀,再经过滤灭菌器灭菌,备用;
(3).  将上述的 (1)和(2)混合均匀,分装于三角瓶中,每瓶分装量为100ml 备用;
(4).  将上述(二)已消毒灭菌的孢子接种于(三)的三角瓶的培养基上,放在摄氏25~28度的恒温箱中培养,经5~7d后,就可分离出纯菌种,再用相同的培养基进行AM真菌纯培养。
  要想对AM真菌的菌剂进行应用推广,现阶段的菌剂生产如下:
  首先确定所应用的宿主植物,使用上述纯AM真菌和内生微生物群落与宿主植物的新鲜的根、茎进行缺氧液体发酵,,所得发酵液即为液体菌剂,也可进一步制成菌丸。上述生物技术可使用分批发酵方式,进一步扩大生产。该菌剂是AM真菌和植物内生微生物群落所组成的混合菌剂,其菌剂与宿主植物构成了多重共生,即植物——AM真菌——内生微生物群落的多重共生,AM真菌与内生微生物群落相互促进、协同发挥作用,拓展了AM真菌的功能的多样性等等。
           课题之二
  混合的AM真菌的菌剂与生物肥料的研发
  选用菜地土(即腐殖质较丰富的土),加水,再加AM真菌和内生微生物群落,混合均匀,最后水要浸过土壤,进行缺氧发酵,发酵后所得土壤,成为被研究的对象,其一,检测它的肥力,并且与发酵前的原土壤的肥力进行比较;其二,评估其土壤腐植酸以及评估其能否兼顾微生物制剂和生物肥料的功能。

                                                广西师范大学教职工:苏先生
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木木
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slshing

铁虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流
如果湿筛法筛孢子有难度,也可用一般的分离植物内生菌的方法,再用所分离出的菌种回接到原宿主植物根系上,验证其是否是AM真菌。关于缺氧液体发酵,是我根据植物内生微生物群落创出来的,在20d内植物组织并不死亡,它们组成复杂的共生体系,等等。其中有许多奇妙的东西等着我们去讨论、去研究、去探索。
木木
3楼2008-09-01 22:58:39
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anlewo7777

木虫 (正式写手)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):积极交流
曾做过湿筛法筛孢子,可是非常难于筛到,而且没有标准确定筛到的是不是?而且,你的缺氧液体发酵会使植物组织死掉这对真菌的生长有没有影响,真菌是厌氧菌吗?
关注一下,看看还有没有人感兴趣
2楼2008-08-30 09:43:15
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argnout

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by slshing at 2008-9-1 22:58:
如果湿筛法筛孢子有难度,也可用一般的分离植物内生菌的方法,再用所分离出的菌种回接到原宿主植物根系上,验证其是否是AM真菌。关于缺氧液体发酵,是我根据植物内生微生物群落创出来的,在20d内植物组织并不死亡 ...

吹牛皮
4楼2008-09-02 18:38:24
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slshing

铁虫 (小有名气)

明天再谈谈如果AM 真菌纯培养获得成功的话,其意义。
木木
5楼2008-09-04 17:07:37
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